pCR™8/GW/TOPO™ TA Cloning Kit with One Shot™ Mach1™-T1R E. coli
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Invitrogen™

pCR™8/GW/TOPO™ TA Cloning Kit with One Shot™ Mach1™-T1R E. coli

Das PCR™8/GW/TOPO™ TA Cloning Kit sorgt für schnelles, effizientes und zuverlässiges Klonen. Darüber hinaus eignet sich dieser Vektor ideal fürWeitere Informationen
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KatalognummerMenge
K25202020 Reaktionen
Katalognummer K252020
Preis (EUR)
958,00
Each
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Menge:
20 Reaktionen
Preis (EUR)
958,00
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Das PCR™8/GW/TOPO™ TA Cloning Kit sorgt für schnelles, effizientes und zuverlässiges Klonen. Darüber hinaus eignet sich dieser Vektor ideal für die Verwendung beim Gateway™ Rekombinationsklonieren in verschiedene Zielvektoren für eine Vielzahl von Anwendungen.

Dieses PCR™8 Cloning Kit hat die folgenden Funktionen:
• Das schnelle fünfminütige TOPO™ TA Cloning liefert 95 % Rekombinanten
• 3´-T-Überhänge vereinfachen die Klonierung von Taq-amplifizierten PCR-Produkten
• Schnellwachsende Machi-Zellen verkürzen die Klonierungszeit
• Kompatibel mit Gateway™ Rekombinations-Klonierung, die den Zugriff auf eine Vielzahl von Zielvektoren ermöglicht
•Sequenzierprimer-Stellen in der Nähe von Klonier-Einfügestellen für mehr Insertsequenz und weniger Vektorsequenz gleich beim ersten Mal
• Spectinomycin-Resistenzgenfür eine robuste Auswahl an E. coli
• EcoRI-Stellen zu beiden Seiten der Insertionsstelle des PCR-Produkts ermöglichen die problemlose Exzision von Inserts

Dieses Kit enthält One Shot™ Mach1™ T1R Chemisch kompetente E. coli.
Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.
Specifications
KlonierungsmethodeTopo™ mit Gateway™
Anzahl Reaktionen20 reactions
ProduktlinieOne Shot
ProdukttypTA-Klonierungskit
Menge20 Reaktionen
VektorpCR
Unit SizeEach
Inhalt und Lagerung
Das pCR™8/GW/TOPO™ TA Cloning Kit enthält den TOPO™ angepassten, gebrauchsfertigen pCR™8/GW/TOPO™ Vektor, dNTPs, Salzlösung, steriles Wasser, Gateway Vorwärts- und -Rückwärts-Sequenzierprimer, Kontroll-Template und PCR-Primer, One Shot™ Mach1™ T1R Chemisch kompetente E. coli, S.O.C. Medium und ein pUC19 Kontrollplasmid. One Shot™ E. coli bei -80 °C lagern. Alle anderen Komponenten bei –20 °C lagern. Alle Reagenzien bleiben bei ordnungsgemäßer Lagerung garantiert 6 Monate stabil

Häufig gestellte Fragen (FAQ)

Can I store my competent E. coli in liquid nitrogen?

We do not recommend storing competent E. coli strains in liquid nitrogen as the extreme temperature can be harmful to the cells. Also, the plastic storage vials are not intended to withstand the extreme temperature and may crack or break.

How should I store my competent E. coli?

We recommend storing our competent E. coli strains at -80°C. Storage at warmer temperatures, even for a brief period of time, will significantly decrease transformation efficiency.

Your Gateway-adapted TOPO vectors are supplied with a control template and control primers. Can I obtain the sequence of the control template?

The sequence of the control template is proprietary.

What is the best ratio of insert:vector to use for cloning? Is there an equation to calculate this?

The optimal ratio is 1:1 insert to vector. Optimization can be done using a ratio of 0.5-2 molecules of insert for every molecule of the vector.

Equation:

length of insert (bp)/length of vector (bp) x ng of vector = ng of insert needed for 1:1 insert:vector ratio

Does Platinum Taq DNA Polymerase High Fidelity enzyme mix leave 3' A-overhangs on the PCR product for subsequent cloning into a TOPO TA or original TA vector?

Yes, the enzyme mix leaves 3' A-overhangs on a portion of the PCR products. However, the cloning efficiency is greatly decreased compared to that obtained with Taq polymerase alone. It is recommended to add 3' A-overhangs to the product for TA cloning.