Premo™ Halide Sensor
Premo™ Halide Sensor
Invitrogen™

Premo™ Halide Sensor

Le capteur d’halogénure Premo™ repose sur une molécule de protéine fluorescente jaune (YFP) sensible aux ions d’halogénure. La combinaison duAfficher plus
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P1022920 ml
Référence P10229
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Le capteur d’halogénure Premo™ repose sur une molécule de protéine fluorescente jaune (YFP) sensible aux ions d’halogénure. La combinaison du biocapteur YFP (Venus) avec une distribution et une expression BacMam efficaces et non cytopathiques offre aux chercheurs un outil très sensible, robuste et facile à utiliser pour sélectionner efficacement les canaux d’ions d’halogénure et les modulateurs de transport dans leurs modèles cellulaires. Aucun instrument spécialisé n’est nécessaire, car le capteur fonctionne sur les plateformes HTS standard. - Propre aux canaux Cl––— mesure le flux d’ions d’halogénure dans les canaux et les transporteurs de chlorure à tension et ligands - Rapide—mesure le flux de chlorure en mode haut débit avec des résultats hautement reproductibles - Robuste—l’expression extrêmement fiable du capteur Venus précis et à maturation rapide offre une excellent fenêtre de signal - Pratique—étudie le flux de chlorure dans votre modèle cellulaire grâce à la délivrance efficace et non cytopathique du capteur d’halogénure Premo™ par la technologie BacMam - Pharmacologiquement pertinent—les modulateurs connus montrent une inhibition dépendante de la dose et la distribution BacMam permet des dosages dans des cellules primaires. Le dosage combine le capteur d’halogénure Venus YFP avec un ion de substitution pour le chlorure (iodure) ; lors de la stimulation du canal ou du transporteur de chlorure, les ions d’iodure réduisent le gradient de concentration dans les cellules et inhibent la fluorescence YFP lors de la liaison ; la quantité d’inhibition est directement proportionnelle au flux d’ions (canal de chlorure ou activité de transporteur). Grâce à la parfaite fluorescence du Venus, la fenêtre de signal du capteur d’halogénure Premo™ est excellente. Nous avons démontré l’utilité et l’efficacité du capteur d’halogénure Premo™ comme un véritable dosage de chlorure HTS “sans lavage” . Le capteur d’halogénure Premo™ est préconditionné et prêt à être utilisé immédiatement. Il contient tous les composants nécessaires à la distribution et à l’expression cellulaires. La sélection peut être effectuée dans un milieu complet et sans aucune étape de lavage. Pour dissocier l’entretien et la préparation des cellules de la sélection, il suffit de congeler les cellules transduites et de les sortir 4 heures avant la sélection. Les lignées cellulaires stables et les cellules primaires humaines peuvent être préparées congelées et “prêtes pour les dosages”.

En savoir plus sur les indicateurs ioniques, notamment les indicateurs de calcium, de potassium, de pH et de potentiel membranaire›
Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.
Spécifications
Type de livraisonBaculovirus (BacMam System)
Méthode de détectionFluorescence
Type de colorantÀ base de protéines
FormeLiquide
Quantité20 ml
Conditions d’expéditionGlace
CibleCanaux ioniques
CouleurJaune
EmissionVisible
À utiliser avec (application)Viabilité et prolifération des cellules
À utiliser avec (équipement)Microscope à fluorescence
Gamme de produitsMolecular Probes, Premo
Type de produitCapteur d’halogénure
Unit SizeEach
Contenu et stockage
Le capteur d’halogénure Premo™ est un capteur pharmacologiquement pertinent pour les études fonctionnelles des canaux de chlorure à ligands et à tension synchronisée. Il s’appuie sur une forme sensible aux halogénures de Venus, la molécule YFP la plus brillante disponible, offrant une excellente fenêtre de signal. Conditionné au format BacMam, sa libération est efficace avec différents types cellulaires, y compris les cellules primaires humaines. Nous avons démontré l’utilité et l’efficacité du capteur d’halogénure Premo™ comme un véritable dosage de chlorure HTS “sans lavage”.
Le capteur d’halogénure Premo™ doit être conservé à 4°C, à l’abri de la lumière. Il est fourni avec un activateur (conserver à 4°C). Lorsqu’il est conservé comme indiqué, ce kit est stable pendant 6 mois.

Foire aux questions (FAQ)

How can I increase the transduction efficiency with the BacMam 2.0 reagents such as the the CellLight and Premo products?

Try varying particle-to-cell ratio (PPC), incubation volume, temperature and, cell density (if adherent cells are transduced). For adherent cells, we recommend a confluence of about 70%. Following the PPC, adjusting the volume is the next best parameter to change to optimize protein expression. If that doesn't work, you can also use the BacMam Enhancer Kit (Cat. No. B10107).

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Citations et références (4)

Citations et références
Abstract
Green fluorescent protein-based halide indicators with improved chloride and iodide affinities.
Authors:Galietta LJ, Haggie PM, Verkman AS,
Journal:FEBS Lett
PubMed ID:11423120
'The green fluorescent protein YFP-H148Q is sensitive to halides by a mechanism involving halide binding and a shift in pK(a). However, a limitation of YFP-H148Q is its low halide sensitivity, with K(d)>100 mM for Cl(-). Indicators with improved sensitivities are needed for cell transport studies, particularly in drug discovery by ... More
Restoration of chloride efflux by azithromycin in airway epithelial cells of cystic fibrosis patients.
Authors:Saint-Criq V, Rebeyrol C, Ruffin M, Roque T, Guillot L, Jacquot J, Clement A, Tabary O,
Journal:Antimicrob Agents Chemother
PubMed ID:21220528
Azithromycin (AZM) has shown promising anti-inflammatory properties in chronic obstructive pulmonary diseases, and clinical studies have presented an improvement in the respiratory condition of cystic fibrosis (CF) patients. The aim of this study was to investigate, in human airway cells, the mechanism by which AZM has beneficial effects in CF. ... More
Small-molecule screen identifies inhibitors of a human intestinal calcium-activated chloride channel.
Authors:De La Fuente R, Namkung W, Mills A, Verkman AS,
Journal:Mol Pharmacol
PubMed ID:18083779
Calcium-activated chloride channels (CaCCs) are widely expressed in mammalian tissues, including intestinal epithelia, where they facilitate fluid secretion. Potent, selective CaCC inhibitors have not been available. We established a high-throughput screen for identification of inhibitors of a human intestinal CaCC based on inhibition of ATP/carbachol-stimulated iodide influx in HT-29 cells ... More
Cell-based imaging of sodium iodide symporter activity with the yellow fluorescent protein variant YFP-H148Q/I152L.
Authors:Rhoden KJ, Cianchetta S, Stivani V, Portulano C, Galietta LJ, Romeo G,
Journal:Am J Physiol Cell Physiol
PubMed ID:16987991
The sodium iodide symporter (NIS) mediates iodide (I(-)) transport in the thyroid gland and other tissues and is of increasing importance as a therapeutic target and nuclear imaging reporter. NIS activity in vitro is currently measured with radiotracers and electrophysiological techniques. We report on the development of a novel live ... More