PolarScreen™ PPARγ-Competitor Assay Kit, Green
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PolarScreen™ PPARγ-Competitor Assay Kit, Green

El ensayo competidor de PPARγ (receptor gamma activado por el proliferador de peroxisoma), Green, utiliza el dominio recombinante humano deMás información
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Número de catálogoCantidad
PV6136800 x 20 μL
Número de catálogo PV6136
Precio (MXN)
-
Cantidad:
800 x 20 μL
El ensayo competidor de PPARγ (receptor gamma activado por el proliferador de peroxisoma), Green, utiliza el dominio recombinante humano de unión a ligando de PPARγ (PPARγ-LBD) marcado con una etiqueta GST N-terminal y un novedoso ligando de PPARγ fluorescente selectivo (Fluormone™ PPARγ Green) de unión estricta en un formato de ensayo homogéneo y de mezcla y lectura. El complejo PPARγ-LBD/Fluormone™ PPARγ Green produce alta polarización. Este complejo se añade a los compuestos de ensayo individuales en placas de micropocillos. Los competidores desplazan el ligando fluorescente Fluormone™ PPARγ Green del complejo PPARγ-LBD/Fluormone™ PPARγ Green, haciendo que el ligando fluorescente se tambalee rápidamente durante su vida de fluorescencia, lo que provoca un valor de polarización bajo. Los no competidores no desplazarán el ligando fluorescente del complejo, por lo que el valor de polarización sigue siendo alto. El cambio en el valor de polarización en presencia de compuestos de ensayo se utiliza para determinar la afinidad relativa de los compuestos de ensayo para PPARγ-LBD.
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
Entrada del ensayoUnión bioquímica competitiva
ColorVerde
Método de detecciónFluorescente
Excitación/emisión485/535
Para utilizar con (aplicación)Ensayo de unión competitiva, polarización de fluorescencia
Para utilizar con (equipo)Lector de microplacas
ID de gen (Entrez)5468
LigandoPPAR
EnvasePlaca de 384 pocillos
Tipo de productoKit de ensayo
Cantidad800 x 20 μL
Presentación de datosPunto final
Condiciones de envíoHielo seco
Entrada dianaPPARG, PPAR gamma, NR1C3
Línea de productosPolarScreen
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
PV3356 — Fluormone™ PPARγ Green (-20 °C)
PV4546 — PPARγ-LBD (-80 °C)
PV3358 — tampón de detección PPARγ (temperatura ambiente)
P2325 — 1M DTT (-80 °C o -20 °C)

Preguntas frecuentes

What are the common issues encountered with FP assays?

-No assay window: Check that your instrument is designed to do FP experiments.
-Poor discrimination between the minimum and maximum mP Control (both include the receptor): This may be an indication of the quality of the receptor. Do not make single use aliquots of the receptor or store diluted.
-The type of microplate is critical: Please see if the protocol specifies untreated polystyrene or NBS-coated plates. If the plate binds the fluorescent substrate, it cannot freely rotate and the mP reading will always be high. White plates cannot be used for FP assays. Avoid the use of silanized pipette tips and vials.
-The “No Receptor Control' (free Fluormone/Tracer) should have much higher RFU values compared to buffer alone. If not, there is a problem with the instrument setup or less commonly with the Fluormone/Tracer.
-If the free Fluormone/Tracer mP value is greater than 100 mP or negative, please refer to the user manual for your instrument and reset the G factor.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Drug Discovery & Development Support Center.

What is the best type of microplate reader for fluorescence polarization (FP) assays?

For FP assays, plate readers must specifically have FP built in. Please see our instrument compatibility portal (http://www.thermofisher.com/us/en/home/industrial/pharma-biopharma/drug-discovery-development/dd-misc/instrument-compatibility-portal.html).

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How can I test the fluorescence polarization (FP) settings of my microplate reader before doing the assay?

We offer a FP One-Step Reference Kit (https://www.thermofisher.com/order/catalog/product/P3088) to detect in green (Ex/Em = 488/535 nm) and red (Ex/Em = 525/590 nm) emission ranges, suitable for the PolarScreen Green and Red Assays. The alternative is to perform the Controls in the respective assay kit prior to performing the actual assay using test compounds.

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