Pierce™ Renilla Luciferase Glow Assay Kit
Pierce™ Renilla Luciferase Glow Assay Kit
Thermo Scientific™

Pierce™ Renilla Luciferase Glow Assay Kit

El kit de ensayo de brillo de luciferasa de Renilla Thermo Scientific Pierce proporciona una señal de bioluminiscencia extremadamente brillanteMás información
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16166Kit de 100 reacciones
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Precio (MXN)
3,511.53
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Kit de 100 reacciones
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El kit de ensayo de brillo de luciferasa de Renilla Thermo Scientific Pierce proporciona una señal de bioluminiscencia extremadamente brillante y estable (vida útil de 3 horas aprox.), especialmente en presencia de indicadores de luciferasa de Renilla verde.

Características del kit de ensayo de brillo de luciferasa de Renilla:

Sensible: detección muy sensible de la actividad de la luciferasa de Renilla verde
Estable: mayor estabilidad de la señal en comparación con los ensayos de flash
Simple: no requiere un luminómetro con inyectores
Compatible: reactivos de ensayo compatibles con otras luciferasas de Renilla
Compatible con la automatización: adecuado para ensayos de alto rendimiento
Práctico: contiene un tampón de lisis celular universal y un reactivo de ensayo de brillo optimizado
Seguro: permite realizar ensayos no radioactivos

Este kit de ensayo de brillo de luciferasa Pierce contiene reactivos para medir la actividad de la luciferasa de Renilla en lisados celulares. En presencia de luciferasa, el reactivo de brillo proporciona una señal bioluminiscente estable y está muy recomendado para su uso con luminómetros sin inyectores o para el procesamiento por lotes de muestras. La salida de luz generada por la reacción de la luciferasa puede correlacionarse con la cantidad de proteína de la luciferasa producida, que a su vez es proporcional a la actividad del promotor de la expresión de conducción de la luciferasa. Aunque los reactivos del ensayo de brillo se han optimizado para obtener los mejores resultados cuando se utilizan con los plásmidos de luciferasa de Renilla verde Thermo Scientific, este kit de brillo puede utilizarse para detectar la actividad de otros derivados de la luciferasa de Renilla que utilizan la coelenterazina como sustrato.

Incluye:
Tampón de lisis celular, tampón y sustrato de reacción

Requiere:
Luciferasa de Renilla y luminómetro u otro instrumento capaz de monitorizar la luminiscencia, como los lectores de microplacas Thermo Scientific Luminoskan Ascent y Varioskan Flash.

Aplicaciones:
• Estudios de promotores para analizar los elementos reguladores cis y los factores de acción trans
• Cribaje de medicamentos
• Cribaje de ARNip y ARNmi
• Ensayos multiplex para estudiar efectos inespecíficos
• Ensayos de transmisión de ruta secretora/localización de proteínas
• Análisis de la vía de transducción de señal
• Estudios de empalme de ARN

La luciferasa de Renilla es una proteína de 36 kDa producida por un derivado del gen natural de luciferasa de Renilla del pensamiento del mar, Renilla reniformis. En comparación con la luciferasa natural, la Renilla verde es más estable en suero y tiene un espectro de emisión que deriva hacia el verde. La proteína proporciona una señal de flash extremadamente brillante que se descompone rápidamente. El reactivo del kit de ensayo de brillo de Renilla Pierce estabiliza de forma eficaz esta bioluminiscencia brillante para producir una señal con una vida media de más de 3 horas, eliminando así la necesidad de utilizar un luminómetro con inyectores. Aunque el kit de ensayo se ha optimizado para obtener los mejores resultados cuando se utiliza con los plásmidos de luciferasa de Renilla verde Thermo Scientific, este kit de brillo puede utilizarse para detectar la actividad de otros derivados de la luciferasa de Renilla que utilizan coelenterazina como sustrato.

Productos relacionados
Kit de ensayo doble de luciferasa de luciérnaga y de Renilla Pierce™
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
ensayoEnzima indicadora, ensayo de indicador de luciferasa
Células compatiblesCélulas de mamíferos
Método de detecciónBioluminiscente
Para utilizar con (equipo)Luminómetro (microplaca)
FormatoPlaca de 384 pocillos, placa de 96 pocillos
Tipo de etiquetaEnzima etiquetada
Línea de productosPierce
CantidadKit de 100 reacciones
SustratoCoelenteracina
Propiedades de sustratoSustrato químico
Tipo de sustratoSustrato de luciferasa
ObjetivoLuciferasa, luciferasa Renilla verde
TécnicaQuimioluminiscencia mejorada
TipoKit de ensayo
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
Tras su recepción, almacene el kit a -80° C o almacene los componentes individuales como se indica anteriormente.
• Tampón de ensayo Glow Renilla, 5 ml, almacenar a 4 °C
• Coelenterazina (100X), 50 µl, almacenar a -80 °C
• Tampón de lisis 2X, 6 ml, almacenar a temperatura ambiente

Preguntas frecuentes

I got a high background signal with a Gaussia/Cypridina/Renilla Luciferase Glow/Luciferase Flash assay. What went wrong?

Here are possible causes and solutions:

- Non-specific oxidation of substrate: Use less serum in the cell culture media; Note: Albumin can increase the auto-oxidation of Vargulin; Avoid repeated freezing and thawing of the sample.
- Control sample is contaminated: Use new sample; Change pipette tips after each well.

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I am getting a high saturating signal with a Gaussia/Cypridina/Renilla Luciferase Glow/Luciferase Flash assay. What could have happened?

This could be due to high luciferase expression. Here are some suggestions:

  • Reduce incubation time before collecting samples. 
  • Decrease the integration time on the instrument.
  • Dilute the sample: for secreted Gaussia/Cypridina Luciferase, dilute the sample using media from the cell culture; for cell lysate, dilute the sample using lysis buffer 


  • Note: A low sample volume can increase assay variability. Dilute the sample and use the recommended volume of 10-20 µL per assay.

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    Why am I getting a low signal in lysate using a Gaussia/Cypridina/Renilla Luciferase Glow/Luciferase Flash assay? Can you provide some suggestions?

    Here are possible causes and solutions:

    - Non-optimized lysis buffer used: Assay luciferase activity in the media to confirm good expression of luciferase; Use only the provided lysis buffer.
    - Low luciferase expression: Lyse cells in smaller volume of 1X Cell Lysis Buffer; Use a different promoter or growth conditions to improve expression; Increase the integration time on the instrument; Scale up volume of sample and reagent per well.

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    I got a low signal in media when I used a Gaussia/Cypridina/Renilla Luciferase Glow/Luciferase Flash assay. What happened?

    Here are possible causes and solutions:

    - Insufficient luciferase accumulation in media: Incubate cells for a longer time.
    - Low luciferase expression: Use less media per well during the experiment;.Use a different promoter or growth conditions to improve expression;.Increase the integration time on the instrument;.Scale-up the volume of sample and reagent per well.
    - Treatment interfered with cellular secretory pathway: Transfect cells with a plasmid for constitutive expression of Luciferase (i.e., with pTK or pCMV promoter); Determine if luciferase actively expresses in media without treatment. Add treatment; Determine if there is a corresponding drop in luciferase activity from the constitutively expressed plasmid.

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    I am getting no signal with my Gaussia/Cypridina/Renilla Luciferase Glow/Luciferase Flash assay. Why is this?

    Here are possible causes and solutions:

    - Low transfection efficiency: Optimize transfection conditions using a visual transfection control (e.g., a plasmid over-expressing a fluorescent protein); Verify plasmid DNA quality - use only transfection grade DNA; Use actively dividing, low passage cells; Use a different cell type.
    - No or low promoter activity: Use conditions known for promoter activation; Incubate cells for a longer time; Change growth conditions to improve expression; Use a different promoter.
    - Substrate auto-oxidized: Protect substrate from light and air; Maintain 100X Coelenterazine at -80 degrees C; maintain 100X Vargulin at -80 degrees C; Prepare new Coelenterazine Working Solution if used longer than 8 hours; Prepare new Vargulin Working Solution if used longer than 2 hours

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