Tinción con plata Pierce™ para espectrometría de masas

La tinción con plata Pierce para espectrometría de masas es un kit completo para la tinción de plata rápida y ultrasensible de proteínas en geles de poliacrilamida y la decoloración eficaz de piezas de gel extirpadas para el análisis de espectrometría de masas. Este kit permite a los usuarios experimentados y a los que lo utilizan por primera vez lograr una tinción consistente y fiable mediante geles de porcentaje alto, bajo y de gradiente en formatos 1D y 2D. El método de tinción optimizado garantiza una tinción extremadamente sensible, al tiempo que minimiza el entrecruzamiento covalente de la proteína con la matriz de gel, lo que puede inhibir la recuperación de la proteína. Los reactivos de decoloración facilitan la eliminación completa de la plata de las bandas de proteínas teñidas y la recuperación máxima de proteínas para el posterior análisis de espectrometría de masas.

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Características:
• Sensibilidad: 0,25 ng por mancha en 30 minutos después de la fijación
• Compatible con MS: los reactivos y el protocolo se optimizan para proporcionar un rendimiento excelente en la espectrometría de masas tras la extracción de péptidos a partir de geles de 1D o 2D (SDS-PAGE) teñidos
• Protocolo de tinción flexible: fija el gel de 15 a 30 minutos o durante la noche sin ningún tipo de efecto en el rendimiento de la tinción; la itinción permanece de 1 a 30 minutos (habitualmente suele ser de 2 a 3 minutos)
• Compatibilidad: tinción con plata eficaz incluso para proteínas básicas difíciles de teñir, como la lisozima (pI 10) y el quimotripsinógeno A (pI 9,2), que se pueden detectar a 0,2 ng y 0,5 ng, respectivamente
• Kit completo: contiene todos los reactivos necesarios para la tinción y la decoloración antes de la proteólisis en gel y la recuperación de péptidos para el análisis por espectrometría de masas

Los métodos de tinción con plata utilizan generalmente glutaraldehído o formaldehído, lo que puede producir un entrecruzamiento covalente de las proteínas entre sí y de la matriz de gel. En caso de que se produjera este entrecruzamiento, se inhibirá la extracción o elución de las proteínas del gel. La tinción con plata Pierce utiliza formaldehído en la tinción y soluciones de revelado. Sin embargo, el procedimiento que acompaña al kit de espectrometría de masas se ha optimizado para maximizar la recuperación polipeptídica sin sacrificar mucho la sensibilidad.