EZ-Link™ Biocytin

La biocitina Thermo Scientific EZ-Link es una variante sencilla de la biotina que contiene una amina primaria en su cadena de ácido valérico, que constituye la base esencial para la construcción de ciertos reactivos de biotinilación de cadena larga y trifuncional.

Características de biocitina EZ-Link:

• Biotinilización: marque moléculas y superficies para ensayos o métodos de purificación por afinidad que impliquen sondas y resinas de avidina o estreptavidina
• Activación por aminas: la amina primaria puede entrecruzarse con proteínas y superficies de materiales utilizando EDC y otros entrecruzadores
• Derivado de la lisina: funciona como un aminoácido marcado con biotina; potencialmente útil como reactivo de control o de enfriamiento en métodos de ensayo de biotina
• Longitud media: el brazo espaciador de longitud media (longitud total añadida al objetivo) mide 20,1 angstroms, lo que representa una extensión de 7 átomos del ácido valérico de biotina nativo

La biocitina es ε-N-[d-biotinil]-L-lisina, un compuesto formado por la conjugación de la amina épsilon de la lisina con la cadena lateral del ácido valérico de la biotina. Contiene carboxilo terminal y grupos de amina, que proporcionan una manipulación funcional para la derivatización o la conjugación a proteínas, superficies y otras moléculas. La mayoría de las veces se utilizan compuestos químicos entrecruzadores de carbodiimida (EDC) y éster NHS para modificaciones covalentes que implican biocitina. El compuesto también es útil como control del aminoácido o patrón de biotina para métodos de ensayos que suponen la unión de estreptavidina.

Elaboramos reactivos de biotina para garantizar los niveles más altos posibles de integridad, uniformidad y rendimiento del producto para aplicaciones de investigación específicas.

Los compuestos de amino-biotina pueden conjugarse a grupos funcionales de proteínas y otras moléculas de diversas maneras. El método más común es el entrecruzamiento de la amina primaria terminal con los grupos de carboxilo utilizando . Los grupos de carboxilo (-COOH) se presentan en los residuos de aspartato o glutamato y en el terminal carboxílico de polipéptidos. Cuando se activa con EDC (n.° de referencia 22980), los carboxilatos reaccionan con grupos amino (—NH2) para formar enlaces de amida.

La biocitina contiene grupos de carboxilo y de amina. Por lo tanto, para prevenir la autoconjugación de la biocitina, los esquemas de reacción mediados por EDC con este compuesto se realizan generalmente en dos pasos, con la ayuda de Sulfo-NHS (n.° de referencia 24510): (1) Activar una molécula de carboxilato utilizando EDC y sulfo-NHS y, después, eliminar por completo o inactivar el reactivo de EDC; a continuación (2) añadir biocitina para permitir que su amina primaria reaccione con los grupos de carboxilo activados por éster sulfo-NHS. Consulte la química del éster NHS. Posteriormente, el resto del grupo de carboxilo de biocitina podrá conjugarse con otra molécula. Por ejemplo, la biocitina es el material de partida para la síntesis de sulfo-SBED (n.° de referencia 33033), un reactivo trifuncional.