Les substrats pour ELISA Thermo Scientific Pierce TMB détectent l’activité de la peroxydase de raifort (HRP), produisant une couleur bleue (Amax = 370 nm et 652 nm) qui devient jaune (Amax = 450 nm) lors de l’ajout d’une solution d’arrêt à l’acide sulfurique ou phosphorique.

Caractéristiques du substrat pour ELISA Thermo Scientific Pierce TMB :

• Disponible dans les formulations traditionnelles ou prêtes à l’emploi
• Aucun réactif supplémentaire ou filtrage requis
• Non cancérogène
• Différents niveaux de sensibilité et de vitesse de développement pour convenir à tout dosage
• Aucun DMF ou DMSO présent dans les réactifs

TMB est le substrat chromogène le plus apprécié pour la détection de HRP dans ELISA et est disponible dans plusieurs formats. Les substrats Pierce 1-Step TMB sont des substrats à un composant qui ne nécessitent aucune préparation avant leur utilisation. Contrairement à d’autres substrats disponibles dans le commerce, ces produits ne contiennent pas de DMF ou de DMSO.
Le 1-Step Ultra TMB Thermo Scientific Pierce offre la plus grande sensibilité parmi les substrats de TMB, suivie du 1-Step Turbo TMB et du 1-Step Slow TMB. La sensibilité du 1-Step Turbo TMB est semblable à celle des substrats basés sur l’OPD et formulés à 1 mg / ml approximativement. Le 1-Step Slow TMB présente une sensibilité intermédiaire : plus sensible que l’ABTS, mais moins sensible que le dichlorhydrate d’o-phénylènediamine (OPD) ou le 1-Step Turbo TMB. Le 1-Step Slow TMB est un substrat idéal pour les études de cinétique.

Le TMB (3,3’,5,5’-tétraméthylbenzidine) est un chromogène qui produit une couleur bleue lorsqu’il est oxydé, généralement à cause des radicaux d’oxygène produits par l’hydrolyse du peroxyde d’hydrogène par la HPR. Pour les dosages ELISA cinétiques ou non arrêtés, le chromogène TMB présente des absorbances maximales à 370 nm et 652 nm. La couleur passe ensuite au jaune lors de l’ajout d’acide sulfurique ou phosphorique avec une absorbance maximale à 450 nm. Un produit de réaction vert peut résulter d’une conversion partielle au produit jaune à partir de l’intermédiaire bleu. Le TMB est un substrat pour ELISA très sensible et est oxydé plus rapidement que les autres substrats HRP, ce qui entraîne un développement plus rapide des couleurs.

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