Eukaryotic 18S rRNA Endogenous Control (VIC™/MGB probe, primer limited)
Eukaryotic 18S rRNA Endogenous Control (VIC™/MGB probe, primer limited)
Applied Biosystems™

Eukaryotic 18S rRNA Endogenous Control (VIC™/MGB probe, primer limited)

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El control endógeno de ARNr eucariota 18S Applied Biosystems™ (sonda de MGB/VIC™, primer limitado) está concebido como un control endógeno.Más información
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El control endógeno de ARNr eucariota 18S Applied Biosystems™ (sonda de MGB/VIC™, primer limitado) está concebido como un control endógeno. Permite la cuantificación relativa de la expresión génica en muestras de ADNc cuando se usa con otros ensayos de expresión génica. La sonda está etiquetada con un tinte VIC™; las MGB y los primers están limitados. Puede utilizarse para reacciones de PCR multiplex o singleplex. El control endógeno está diseñado para su uso con ensayos de expresión génica TaqMan inventariados y sin inventariar, ensayos personalizados de expresión génica y/o con primers y sondas personalizados TaqMan™.

Detalles del ensayo:

Símbolo de gen: 18S
Secuencia de referencia: X03205.1
Ubicación del exón de la sonda: ND
Tamaño del amplicón: 187 de infrarrojo

Controles endógenos TaqMan™

Utilice los controles endógenos TaqMan™ como controles para cuantificar la expresión génica y olvídese de pasar meses diseñando el ensayo, preparando formulaciones y realizando pruebas. Esta práctica colección de conjuntos de sondas y primers prediseñados le permite normalizar la cantidad de ARN o ADN de muestra de una reacción.

Solución completa para la expresión génica cuantitativa

¿Le cuesta decidir qué controles utilizar para cuantificar la expresión génica, incluso a pesar de contar con información detallada sobre los sistemas biológicos? Ahora, gracias a los controles endógenos TaqMan™, puede evitar el proceso de prueba y error asociado con la selección de controles para los genes eucariotas, humanos, de ratón y de rata más comunes.

Fácil de utilizar

Todos los componentes de los controles endógenos TaqMan™ se someten a pruebas de control de calidad y de funcionalidad y están formulados en una sola mezcla 20X. Los controles no solo son fáciles de utilizar, sino que también son totalmente compatibles con las condiciones universales para el RT-PCR de dos etapas. Solamente tiene que añadir en los instrumentos Applied Biosystems (incluidos los sistemas de PCR en tiempo real Applied Biosystems 7900HT, 7300 y 7500 y los sistemas de detección de secuencia 7000 y 7700) la mezcla maestra de PCR universal TaqMan™ (con o sin UNG AmpErase™) a su muestra de ADNc para generar datos de expresión génica sensibles, reproducibles y realmente cuantitativos.

Oferta flexible

Para fabricar los controles endógenos utilizamos nuestra composición química de 5' nucleasa probada. Para obtener la máxima flexibilidad, puede elegir entre dos tintes marcadores y dos desactivadores:
• Una sonda de MGB TaqMan™ marcada con tinte FAM™ (250 nM, concentración final) y dos primers de PCR sin etiquetar (900 nM cada uno)
• Una sonda de MGB TaqMan™ marcada con tinte VIC™ (250 nM, concentración final) y dos primers de PCR sin etiquetar (150 nM cada uno, primer limitado)
• Una sonda TAMRA™ marcada con tinte VIC™ (250 nM, concentración final) y dos primers de PCR sin etiquetar (150 nM cada uno, primer limitado)

Selección del control endógeno correcto

Los controles endógenos pueden normalizar los niveles de expresión de los genes objetivo mediante la corrección de las diferencias en la cantidad de ADNc que se carga en los pocillos de reacción de PCR. Para obtener los mejores resultados, compruebe que el control endógeno se expresa de forma uniforme en el conjunto de muestras que se va a probar. La expresión del control endógeno debe ser uniforme en todas las muestras del estudio. Para multiplexing, asegúrese de que el nivel de expresión génica del control endógeno es mayor que el del objetivo.

PCR multiplex frente a singleplex

Todos los controles endógenos TaqMan™ que contienen sondas etiquetadas con el tinte marcador CIV™ están limitados por el primer. Esto permite el multiplexing de los controles endógenos TaqMan™ con los ensayos de expresión de los genes objetivo, siempre que el gen de control se exprese más abundantemente que el gen objetivo. Todos los controles endógenos TaqMan™ que contienen sondas etiquetadas con el tinte marcador FAM™ no tienen límite de primer y no están concebidos para multiplexing.

Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
Número de accesoX03205.1.
Tamaño del amplicón187
FormatoTubo
Símbolo de gen18S.
Características ecológicasEmbalaje sostenible
N.º de reacciones2500 reacciones
Línea de productosTaqMan, VIC
Cantidad2500 reactions
Condiciones de envíoTemperatura ambiente
EspecieEucariota, rata, ratón, humano
ObjetivoARNr 18S
Concentración20X
Método de detecciónSonda de cebado
Para utilizar con (aplicación)Expresión génica
FormularioLíquido
Etiqueta o tinteVIC
Método de PCRRT-qPCR de 2 paso
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
Conjuntos de sondas de cebador de control

Preguntas frecuentes

I am working on both mouse and human samples for gene expression studies. Do you have one endogenous control that I can use with both species?

The 18S rRNA is highly conserved among eukaryotes. We have several configurations of assays for this gene: P/N 4331182, Assay ID: Hs99999901_s1; PN 4319413E, 4310893E, 4333760T, 4333760F, 4308329. You can use any of these for both human and mouse samples, as well as samples from any other eukaryotic species.

What are the key features of a TaqMan MGB probe?

TaqMan MGB probes have a nonfluorescent quencher at the 3´ end and a minor groove binder at the 3´ end that increases the melting temperature (Tm) of probe, allowing the use of shorter probes.  For more information on MGB probes, please consult the following manual: "Primer Express v1.5 and TaqMan MGB Probes for Allelic Discrimination: All PCR Instruments: User Bulletin." You can find a copy on our website by entering this title in the main search box.

When using the TaqMan Gene Signature Plates, should I mix the reactions after adding the master mix and template to the wells containing lyophilized primers and probe?

No, but it is recommended that the plate be centrifuged to draw down the liquid to the bottom of the wells.

What are your recommendations for the best way to dilute and store my TaqMan probe?

The probe should be diluted in TE buffer [10 mM Tris-HCl, pH 8.0 (at 25°C), 1 mM EDTA]. We recommend storing your probes, both stocks and working solutions, at -20°C in aliquots. This is to cut down on the number of times the probe is subject to freeze-thaws. For detailed information on diluting primers and probes, please refer to the tutorial entitled "Reconstituting and Diluting Primers and TaqMan Probes". You can find it on our website by entering this title in the main search field.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within ourTaqMan Primers and Probes Support Center.