Alexa Fluor™ 594 NHS Ester (Succinimidyl Ester)
Alexa Fluor™ 594 NHS Ester (Succinimidyl Ester)
Invitrogen™

Alexa Fluor™ 594 NHS Ester (Succinimidyl Ester)

Alexa Fluor™ 594 es un tinte rojo brillante. El tinte Alexa Fluor™ 594, empleado para la generación estable de señalesMás información
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Número de catálogoCantidad
A201045 mg
A375723 x 100 μg
A200041 mg
A3756525 mg
Número de catálogo A20104
Precio (MXN)
-
Cantidad:
5 mg
Alexa Fluor™ 594 es un tinte rojo brillante. El tinte Alexa Fluor™ 594, empleado para la generación estable de señales para la obtención de imágenes en citometría de flujo, es soluble en agua e insensible al pH entre pH 4 y pH 10. Además de las formulaciones de colorante reactivo, ofrecemos el colorante Alexa Fluor™ 594 conjugado con una serie de anticuerpos, péptidos, proteínas, trazadores y sustratos de amplificación optimizados para la detección y el etiquetado celular (más información).

El éster de NHS (o éster de succinimidilo) de Alexa Fluor™ 594 es la herramienta más empleada para conjugar este colorante con una proteína o anticuerpo. Los ésteres NHS se pueden usar para etiquetar aminas primarias (R-NH2) de proteínas, oligonucleótidos modificados por aminas y otras moléculas que contengan aminas. El conjugado Alexa Fluor™ obtenido mostrará una fluorescencia más brillante y mayor fotoestabilidad que los conjugados de otros fluoróforos espectralmente similares.

Información detallada sobre este éster de NHS AlexaFluor™:

Etiqueta de fluoróforo: Tinte Alexa Fluor™ 594
Grupo reactivo: Éster NHS
Reactividad: Aminas primarias en proteínas y ligandos, oligonucleótidos modificados con aminas
Ex/Em del conjugado: 590/617 nm
Coeficiente de extinción: 92 000 cm-1M-1
Tintes espectralmente similares: Texas Red™, Bodipy-TR
Peso molecular: 819,8

Reacción de conjugación habitual
Puede conjugar agentes aminorreactivos con prácticamente cualquier proteína o péptido (el protocolo proporcionado está optimizado para anticuerpos IgG). Puede ampliar la reacción para cualquier cantidad de proteína, pero la concentración de la proteína debe ser al menos de 2 mg/ml para obtener unos resultados óptimos. Recomendamos probar tres grados de etiquetado distintos y emplear tres proporciones molares diferentes del reactivo en la proteína.

El éster NHS Alexa Fluor™ suele disolverse en dimetilformamida (DMF) anhidra o dimetilsulfóxido (DMSO) (D12345) de gran calidad, y la reacción se lleva a cabo en un tampón de bicarbonato sódico de 0,1–0,2 M, pH 8,3, a temperatura ambiente durante una hora. Dado que la pKa de la amina terminal es inferior a la del grupo amino épsilon de lisina, puede realizar un etiquetado más selectivo de la terminal amina mediante un tampón más cercano al pH neutro.

Purificación del conjugado
Los anticuerpos etiquetados se separan normalmente del tinte Alexa Fluor™ mediante una columna de filtración en gel, como Sephadex™ G-25, BioGel™ P-30 o equivalentes. Para cantidades mucho mayores o menores de proteínas, seleccione un medio de filtración en gel con un corte de peso molecular adecuado o purifique por diálisis. Ofrecemos varios kits de purificación optimizados para diferentes cantidades de conjugado de anticuerpos:
Kit de purificación de conjugado de anticuerpos para 0,5-1 mg (A33086)
Kit de purificación de conjugado de anticuerpos para 20-50 µg (A33087)
Kit de purificación de conjugado de anticuerpos para 50-100 µg (A33088)

Más información sobre el etiquetado de proteínas y anticuerpos
Ofrecemos una amplia selección de kits de etiquetado de anticuerpos y proteínas Molecular Probes™ que se ajustan a su material de partida y a su configuración experimental. Consulte nuestros kits de etiquetado de anticuerpos o utilice nuestra herramienta de selección química de etiquetado para otras opciones. Para obtener más información acerca de nuestros kits de marcado, lea la sección 1.2 sobrekits para marcado de proteínas y ácidos nucleicos del manual de Molecular Probes™.

Creamos conjugados personalizados
Si no encuentra lo que busca en nuestro catálogo en línea, le prepararemos el conjugado de anticuerpos o proteínas que desee. Nuestro servicio de conjugación personalizada es eficiente y confidencial, y garantizamos la calidad de nuestro trabajo. Contamos con la certificación ISO 9001:2000.
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
Reactividad químicaAmina
Emisión617 nm
Excitación590 nm
Etiqueta o tinteAlexa Fluor™ 594
Tipo de productoTinte
Cantidad5 mg
Fracción reactivaEster activo, succinimidilo éster
Condiciones de envíoTemperatura ambiente
Tipo de etiquetaColorantes Alexa Fluor
Línea de productosAlexa Fluor
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
Almacenar en el congelador (de – 5 a – 30 °C) y proteger de la luz.

Preguntas frecuentes

I am labeling a protein with Alexa Fluor 488 SDP ester. The manual recommends using a sodium bicarbonate buffer at pH 8.3. Can I use a different buffer instead?

Yes. The important thing is to use a buffered solution with a pH between 8.0 and 8.5. Do not use Tris buffer, which has amine groups. Most other buffers will work fine in that pH range. This is also true for other amine-reactive dyes, such as succinimidyl (NHS) esters or TFP esters.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

I am not going to use all of my Alexa Fluor succinimidyl ester reactive dye. Can I just make it up in DMSO and store aliquots at -20 degrees C?

This is not recommended. Any trace amounts of water in the DMSO can promote spontaneous hydrolysis over time. Even if using anhydrous DMSO, DMSO is hygroscopic; it readily absorbs moisture from the atmosphere over time. A better alternative is to dissolve the reactive dye in a volatile solvent, make smaller aliquots and then evaporate off the solvent using a vacuum pump. The smaller aliquots of solid reactive dye should then be stored frozen, desiccated and protected from light. Contact Technical Support by sending an email to techsupport@thermofisher.com for the recommended volatile solvent.

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Citations & References (54)

Citations & References
Abstract
PKC-induced intracellular trafficking of Ca(V)2 precedes its rapid recruitment to the plasma membrane.
Authors:Zhang Y, Helm JS, Senatore A, Spafford JD, Kaczmarek LK, Jonas EA,
Journal:J Neurosci
PubMed ID:18322103
'Activation of protein kinase C (PKC) potentiates secretion in Aplysia peptidergic neurons, in part by inducing new sites for peptide release at growth cone terminals. The mechanisms by which ion channels are trafficked to such sites are, however, not well understood. We now show that PKC activation rapidly recruits new ... More
Development of a novel FRET immunosensor technique.
Authors:Lichlyter DJ, Grant SA, Soykan O
Journal:Biosens Bioelectron
PubMed ID:14611757
'We report on a novel technique to develop an optical immunosensor based on fluorescence resonance energy transfer (FRET). IgG antibodies were labeled with acceptor fluorophores while one of three carrier molecules (protein A, protein G, or F(ab'')2 fragment) was labeled with donor fluorophores. The carrier molecule was incubated with the ... More
A lipid receptor sorts polyomavirus from the endolysosome to the endoplasmic reticulum to cause infection.
Authors:Qian M, Cai D, Verhey KJ, Tsai B,
Journal:PLoS Pathog
PubMed ID:19503604
'The mechanisms by which receptors guide intracellular virus transport are poorly characterized. The murine polyomavirus (Py) binds to the lipid receptor ganglioside GD1a and traffics to the endoplasmic reticulum (ER) where it enters the cytosol and then the nucleus to initiate infection. How Py reaches the ER is unclear. We ... More
Sensitive fluorescence polarization technique for rapid screening of alpha-synuclein oligomerization/fibrillization inhibitors.
Authors:Luk KC, Hyde EG, Trojanowski JQ, Lee VM,
Journal:Biochemistry
PubMed ID:17927212
'Parkinson''s disease (PD) is characterized by the accumulation of fibrillar alpha-synuclein (alpha-Syn) inclusions known as Lewy bodies (LBs) and Lewy neurites. Mutations in the alpha-Syn gene or extra copies thereof cause familial PD or dementia with LBs (DLB) in rare kindreds, but abnormal accumulations of wildtype alpha-Syn also are implicated ... More
Persistent cAMP-signals triggered by internalized G-protein-coupled receptors.
Authors:Calebiro D, Nikolaev VO, Gagliani MC, de Filippis T, Dees C, Tacchetti C, Persani L, Lohse MJ,
Journal:PLoS Biol
PubMed ID:19688034
'G-protein-coupled receptors (GPCRs) are generally thought to signal to second messengers like cyclic AMP (cAMP) from the cell surface and to become internalized upon repeated or prolonged stimulation. Once internalized, they are supposed to stop signaling to second messengers but may trigger nonclassical signals such as mitogen-activated protein kinase (MAPK) ... More