RiboPure™ RNA Purification Kit, blood

Das RiboPure™-Blood Kit ist für die Isolierung von hochwertiger RNA direkt aus Vollblut vorgesehen. Das Kit kombiniert zwei Methoden der RNA-Aufreinigung für die effiziente Entfernung von Blutbestandteilen (Protein, Häme, genomische DNA und RNasen), die nachgelagerte Verfahren beeinträchtigen können. Das Kit enthält genügend Reagenzien für 40 RNA-Reinigungen aus Vollblutproben von jeweils 0,3–0,5 ml. Vorteile des RiboPure™-Blood Kit:

• Reinigung der Gesamt-RNA direkt aus Vollblut — ohne vorherige Rückgewinnung von WBCs
• Einfacher, schneller Prozess —von Blut zu RNA in weniger als 30 Minuten
• Enthält RNAlater™ Lösung — Blutproben 3 Tage oder mehr bei Raumtemperatur lagerbar
• Enthält DNA-free™ Reagenzien — zur Erstellung von RNA für RT-PCR und Array-Analyse

Anwendungen
Das RiboPure™ Blutkit bietet eine hohe Ausbeute an reiner RNA direkt aus Vollblut, wodurch die Notwendigkeit entfällt, WBCs vor der RNA-Aufreinigung zu isolieren. Mit dem RiboPure™-Blood Kit rückgewonnene RNA kann in den anspruchsvollsten Anwendungen zum Einsatz kommen, einschließlich Echtzeit-RT-PCR und Array-Analyse. Die durchschnittliche RNA-Ausbeute liegt zwischen 2–4 µg/0,5 ml Vollblut (Abweichungen sind auf Unterschiede in den WBC-Zahlen zwischen den Proben zurückzuführen).

RNA im Vollblut stabilisieren
Beim Sammeln von Blutproben für die RNA-Analyse ist oft eine Lagerung der Proben vor der RNA-Isolierung erforderlich. Das RiboPure™-Blood Kit enthält RNAlater™ Lösung zur Stabilisierung der RNA in Vollblut. Außerdem wird damit das Genexpressionsprofil der Zellen “eingefroren”. Behandelte Proben können bei Umgebungstemperatur für längere Zeit (bis zu drei Tage oder mehr) sicher aufbewahrt werden. Blutproben, die in der RNAlater™-Lösung gelagert werden, liefern RNA von vergleichbarer Qualität wie direkt verarbeitete Blutproben (siehe Abbildung).

Einfaches Verfahren ergibt hochreine RNA
Das RiboPure™ Blutverfahren besteht aus drei Schritten: 1) Zugabe von Lyselösung direkt zu mit RNAlater™ behandeltem oder frischem Blut, 2) erste RNA-Aufreinigung durch Phenol-Chloroform-Extraktion und 3) endgültige RNA-Aufreinigung über einen Glasfaserfilter. Danach kann eine zusätzliche DNase-Behandlung mit den im Kit enthaltenen DNA-free™ Reagenzien durchgeführt werden. Das gesamte Verfahren einschließlich der DNase-Behandlung kann in weniger als 1 Stunde abgeschlossen werden.

Zubehörprodukte
Die RNA kann anschließend mit unseren GLOBINclear™ Kits zur selektiven Entfernung von Globin-Transkripten mit mRNA weißer Blutzellen (WBC) angereichert werden. Das Mouse RiboPure™-Blood RNA Isolation Kit (Kat.- Nr. AM0951) steht auch für die Rückgewinnung von Gesamt-RNA — und optional von microRNA — direkt aus Mäuse- oder Rattenblut zur Verfügung. Mouse RiboPure™-Blood enthält mit RNAlater™ Lösung vorbeladene Probenröhrchen zur Vermeidung von RNA-Abbau und zur Erhaltung der RNA-Profile.