Proteinase K Powder
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Proteinase K Powder

La proteinasa K del hongo Engyodontium album es una proteasa serina inespecífica que es útil para la digestión de proteínasMás información
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Número de catálogoCantidad
AM2542100 mg
AM2544500 mg
Número de catálogo AM2542
Precio (MXN)
-
Cantidad:
100 mg
La proteinasa K del hongo Engyodontium album es una proteasa serina inespecífica que es útil para la digestión de proteínas en general.

La proteinasa K permanece activa:
• En un amplio intervalo de pH (actividad óptima entre 6,5 y 9,5)
• En condiciones de desnaturalización (p. ej., en presencia de urea o dodecilsulfato sódico [SDS])
• En presencia de agentes de quelato metálico (por ejemplo, EDTA)
• En temperaturas comparativamente altas (la temperatura de digestión óptima es de 65 °C)

Aplicaciones: Extracción de endonucleasas endógenas durante la preparación de ADN y ARN; preparación de secciones de tejido para hibridación in situ hybridization.

Pruebas de rendimiento y calidad: Ensayos de exodesoxirribonucleasa y endodesoxirribonucleasa; forma líquida probada para comprobar la ausencia de actividad de ARNasa.

Definición de la unidad: Una unidad de mAnson se describe como la cantidad de enzima que libera 1 μmol de aminoácido Folin positivo en un minuto a 37 °C, empleando hemoglobina como sustrato.

Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.

Especificaciones
Especie del huéspedT. album
EnvaseFrasco
Tipo de productoProteinase K
Cantidad100 mg
Condiciones de envíoHielo seco
Línea de productosAmbion
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
Almacenar el polvo seco en desecante a – 20 °C.

Preguntas frecuentes

How do I isolate DNA from single bacterial colonies before PCR?

Scrape a single colony from the surface of an agar plate and transfer to 12 µL of SCL solution [10 mM Tris-HCl (pH 7.5), 1 mM EDTA, 50 µg/mL proteinase K] and incubate for 15 min at 55 degrees C. Inactivate proteinase K for 15 min at 80 degrees C and add 20 µL of deionized water. Centrifuge at 12,000 x g for 3 min. Transfer the supernatant to a new tube.

What are the recommended conditions for proteinase K treatment when isolating RNA or DNA samples?

Concentration: Generally proteinase K is used in the concentration range of 50 to 500 µg/mL at 65 degrees C in the presence of SDS (0.5-1%).

Temperature optimum: 65 degrees C; 12X more active at 65 degrees C than at 25 degrees C.

pH: Proteinase K is stable over a wide pH range (4.0 to 12.5), with optimal activity at pH 6.5 to 9.5. It is most stable at pH 8.
Inactivation: Heat inactivate Proteinase K at 80 degrees C for 15 min. Phenol extraction is the recommended method to ensure complete inactivation.

Inhibited by: PMSF (0.1 to 1.0 mM of PMSF is usually sufficient for inhibition of Proteinase K)

Not inhibited by: Proteinase K is not inactivated by metal ions, chelating agents (e.g., EDTA), sulfhydryl reagents or by trypsin or chymotrypsin inhibitors. Activity can be stimulated by addition of denaturing agents (SDS and urea).