Terminale Desoxynukleotidyltransferase (20 U/μl)

Thermo Scientific Terminal Deoxynucleotidyl Transferase (TdT) ist eine matrizenunabhängige DNA-Polymerase, die wiederholt Desoxyribonukleotide an das 3'-OH-Ende von Oligodesoxyribonukleotiden sowie von einzel- und doppelsträngiger DNA anhängt. Der von TdT benötigte Primer ist ein Oligonukleotid mit mindestens drei Nukleotiden. TdT weist mit RNA als Template eine variable Leistung auf, die stark von der tertiären Struktur der 3'-Enden der Akzeptor-RNA und der Art der Nukleotiden abhängt. Ist im Allgemeinen niedriger als bei Verwendung von DNA als Matrize.

Highlights

• Bringt modifizierte Nukleotide (z. B. Fluorescein-, Biotin-, Aminoallyl-markierte Nukleotide)

Anwendungen

• Produktion synthetischer Homo- und Heteropolymere
• Homopolymer-Tailing linearer Duplex-DNA mit beliebigen 3'-OH-Enden
• Oligodeoxyribonukleotid und DNA-Markierung
• 5'-RACE (schnelle Amplifikation von cDNA-Enden)
• In-Situ-Lokalisierung der Apoptose

Hinweis

Aufgrund des Vorhandenseins von CoCl₂ ist der TdT-Reaktionspuffer mit Downstream-Anwendungen kompatibel. Das CoCl₂ muss aus dem Reaktionsgemisch über eine Zentrifugationssäule oder Phenol- bzw. Chloroformextraktion und anschließender Ethanolausfällung entfernt werden.