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Fluo-5N, AM, cell permeant - Special Packaging
Zitierungen und Referenzen (15)
Invitrogen™

Fluo-5N, AM, cell permeant - Special Packaging

Markierte Calcium-Indikatoren sind Moleküle, die nach Ca2+-Bindung eine erhöhte Fluoreszenz zeigen. Fluo-5F, Fluo-5N und Fluo-4ff sind Analoga von Fluo-4 mitWeitere Informationen
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KatalognummerMenge
F1420410 x 50 μg
Katalognummer F14204
Preis (EUR)
567,84
Exklusiv online
676,00
Ersparnis 108,16 (16%)
Each
Menge:
10 x 50 μg
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Markierte Calcium-Indikatoren sind Moleküle, die nach Ca2+-Bindung eine erhöhte Fluoreszenz zeigen. Fluo-5F, Fluo-5N und Fluo-4ff sind Analoga von Fluo-4 mit geringerer Ca2+-Bindungsaffinität und eignen sich daher für den Nachweis intrazellulärer Calciumspiegel im Bereich von 1 µM bis 1 mM, die zu einer Sättigung der Reaktion von Fluo-3 und Fluo-4 führen würden. Zellen können mit den AM-Esterformen dieser Calcium-Indikatoren beladen werden, indem der gelöste Indikator direkt den Schalen mit den kultivierten Zellen hinzugefügt wird. Diese Indikatoren sind mit einer Anregung bei 488 nm durch Argon-Ionen-Laserquellen kompatibel und eignen sich daher für Konfokalmikroskopie, Durchflusszytometrie und Mikroplatten-Screenings.

Erfahren Sie mehr über Ionen-Indikatoren wie Calcium-, Kalium-, pH- und Membranpotential-Indikatoren ›

Spezifikationen des Calcium-Indikators (AM-Ester):
• Markierung (Ex/Em der Ca2+–gebundenen Form): Fluo-5N (494/516 nm)
• Steigerung der Fluoreszenzintensität bei Bindung an Ca2+: >100-facher
• Kd-Wert für Ca2+ in Puffer: ∼90 µM
• Zeigt Fluoreszenzerhöhung nach Ca2+-Bindung mit geringer Wellenlängenverschiebung

Anwendung von TPEN zur Kontrolle von Schwermetallkationen
Ferner binden BAPTA-basierte Indikatoren wie diese verschiedene Schwermetallkationen (z. B. Mn2+, Zn2+, Pb2+) mit wesentlich höherer Affinität als Ca2+. Störungen bei Calcium-Messungen durch das Vorhandensein dieser Ionen können mit dem schwermetallselektiven Chelator TPEN unter Kontrolle gebracht werden.

Mehr Auswahl für fluoreszierende Calcium-Indikatoren
Wir bieten eine große Auswahl an Molecular Probes™ Calcium-Indikatoren für die Verwendung in verschiedenen experimentellen Szenarien an. Weitere Informationen finden Sie unter Fluorescent Ca2+ Indicators Excited with Visible Light, Abschnitt 19.3 im Molecular Probes™ Handbuch.

Für UV-anregbare Ca2+-Indikatoren, Protein-basierte Ca2+-Indikatoren, Konjugate von Ca2+-Indikatoren und fluoreszenzbasierte Indikatoren anderer Metallionen (d. h. Mg2+, Zn2+) siehe Indikatoren für Ca2+, Mg2+, Zn2+ und andere Metallionen, Kapitel 19 im Molecular Probes™ Handbuch.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für therapeutische oder diagnostische Zwecke bei Menschen oder Tieren vorgesehen.
Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.
Specifications
NachweisverfahrenFluoreszent
FarbstofftypFarbstoffbasiertes Fluoreszenzmittel
Menge10 x 50 μg
VersandbedingungRaumtemperatur
Zur Verwendung mit (Anwendung)Viabilität und Proliferation von Zellen
Zur Verwendung mit (Geräte)Konfokalmikroskop, Fluoreszenzmikroskop, High Content Gerät, HTS-Lesegerät, Mikrotiterplatten-Lesegerät, Fluoreszenz-Imager
ProdukttypCalcium-Indikator
Unit SizeEach
Inhalt und Lagerung
Im Tiefkühlgerät bei –5 bis –30 °C aufbewahren und vor Licht schützen.

Häufig gestellte Fragen (FAQ)

I am doing calcium flux imaging with your Fura-2 calibration kit, but am seeing a large variability in ratio in different places around the slide. I am correcting for uniform illumination, using the product as directed, and sealing the coverslip with nail polish.

The nail polish may be the problem. The Kd value (calcium sensitivity) changes depending upon the dye's environment. Nail polish has solvents that can leech under the coverslip and cause variability. We recommend either going without a sealing or sealing with melted paraffin painted on the coverslip edges with a cotton-tipped applicator (paraffin is hydrophobic and has no solvents).

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

I need to label cells with Fluo-4, AM, for a calcium flux assay. How long after labeling will the dye be retained?

After loading dye into the cells, intracellular esterases remove the 'AM' moiety from the dye. When the 'AM' group is removed, the dye is able to bind calcium and fluoresce. Since the dye is not covalently bound to any cellular components, it may be actively effluxed from the cell. The rate of efflux is dependent upon the inherent properties of the cell, culture conditions and other factors. The dye may be retained for hours, days or even weeks or lost in a matter of minutes. The use of Probenecid (Cat. No. P36400) limits loss by active efflux.

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Zitierungen und Referenzen (15)

Zitierungen und Referenzen
Abstract
The use of the indicator fluo-5N to measure sarcoplasmic reticulum calcium in single muscle fibres of the cane toad.
Authors:Kabbara AA, Allen DG
Journal:J Physiol
PubMed ID:11432994
'1. Single fibres from the lumbrical muscles of the cane toad (Bufo marinus) were incubated in fluo-5N AM for 2 h at 35 degrees C in order to load the indicator into the sarcoplasmic reticulum. Fluo-5N is a low-affinity calcium indicator (K(Ca) 90 microM). Successful sarcoplasmic reticulum (SR) loading was ... More
Cardiac alternans do not rely on diastolic sarcoplasmic reticulum calcium content fluctuations.
Authors:Picht E, DeSantiago J, Blatter LA, Bers DM,
Journal:Circ Res
PubMed ID:16946134
'Cardiac alternans are thought to be a precursor to life-threatening arrhythmias. Previous studies suggested that alterations in sarcoplasmic reticulum (SR) Ca2+ content are either causative or not associated with myocyte Ca2+ alternans. However, those studies used indirect measures of SR Ca2+. Here we used direct continuous measurement of intra-SR free ... More
Kinesin dependent, rapid, bi-directional transport of ER sub-compartment in dendrites of hippocampal neurons.
Authors:Bannai H, Inoue T, Nakayama T, Hattori M, Mikoshiba K
Journal:J Cell Sci
PubMed ID:14676272
'Although spatially restricted Ca2+ release from the endoplasmic reticulum (ER) through intracellular Ca2+ channels plays important roles in various neuronal activities, the accurate distribution and dynamics of ER in the dendrite of living neurons still remain unknown. To elucidate these, we expressed fluorescent protein-tagged ER proteins in cultured mouse hippocampal ... More
Ca2+ blinks: rapid nanoscopic store calcium signaling.
Authors:Brochet DX, Yang D, Di Maio A, Lederer WJ, Franzini-Armstrong C, Cheng H
Journal:Proc Natl Acad Sci U S A
PubMed ID:15710901
'Luminal Ca(2+) in the endoplasmic and sarcoplasmic reticulum (ER/SR) plays an important role in regulating vital biological processes, including store-operated capacitative Ca(2+) entry, Ca(2+)-induced Ca(2+) release, and ER/SR stress-mediated cell death. We report rapid and substantial decreases in luminal [Ca(2+)], called "Ca(2+) blinks," within nanometer-sized stores (the junctional cisternae of ... More
Sulfhydryl oxidation overrides Mg(2+) inhibition of calcium-induced calcium release in skeletal muscle triads.
Authors:Donoso P, Aracena P, Hidalgo C
Journal:Biophys J
PubMed ID:10866954
'We studied the effect of oxidation of sulfhydryl (SH) residues on the inhibition by Mg(2+) of calcium-induced calcium release (CICR) in triad-enriched sarcoplasmic reticulum vesicles isolated from rabbit skeletal muscle. Vesicles were either passively or actively loaded with calcium before eliciting CICR by dilution at pCa 4.6-4.4 in the presence ... More
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