TCEP-HCl Pierce™, formato No-Weigh™

La solución TCEP-HCI Thermo Scientific Pierce es un agente reductor potente, versátil, inodoro y sin tioles, de amplia aplicación a proteínas y otras investigaciones que impliquen reducción de puentes disulfuro. El compuesto único es fácilmente soluble y muy estable en muchas soluciones acuosas. La TCEP reduce los puentes disulfuro tan eficazmente como el ditiotreitol (DTT), pero a diferencia de este y otros agentes reductores que contienen tiol, la TCEP no se tiene que eliminar antes de ciertas reacciones de entrecruzamiento de reacción con el sulfhidrilo.

Los productos Thermo Scientific No-Weigh son reactivos especiales suministrados en un formato previamente indicado. El envase prepesado evita la pérdida de reactividad del reactivo y la contaminación con el tiempo eliminando la apertura y el cierre repetitivos del vial. El formato permite el uso de un vial de reactivo fresco cada vez, lo que elimina la molestia de pesar pequeñas cantidades de reactivos y reduce las preocupaciones sobre la estabilidad del reactivo.

Características de TCEP-HCI:

• Inodora: a diferencia del DTT o el BME, la TCEP no tiene olor, por lo que puede reducir las proteínas de forma cómoda en su meda de trabajo. Además, contribuye a un entorno de laboratorio más saludable.
• Específica: reducción selectiva y completa de hasta los disulfuros solubles en agua más estables en un amplio intervalo de pH.
• Simple: reducción eficaz a temperatura ambiente y pH 5 en menos de cinco minutos.
• Estable: su estabilidad y resistencia propias a la oxidación por aire acaban con la necesidad de tomar cualquier precaución especial durante su manipulación o almacenamiento. No es volátil y no reacciona con otros de los grupos funcionales de las proteínas.
• Eficaz: para la mayoría de las aplicaciones, de 5 a 50 mM de TCEP proporcionan el exceso molar suficiente para reducir de forma eficaz los puentes de péptidos o proteínas disulfuro en unos pocos minutos y a temperatura ambiente.
• Compatible: con la TCEP no es necesario eliminar el agente reductor antes de la mayoría de las aplicaciones (por ejemplo, en la purificación de proteínas marcadas con histidina o en las conjugaciones de maleimida).

Consideraciones sobre el uso de la TCEP:
• La TCEP es generalmente muy soluble en tampones acuosos a casi cualquier pH. Por lo tanto, las concentraciones de trabajo y las soluciones madre 10X pueden prepararse fácilmente en la mayoría de los tampones acuosos.
• La TCEP es estable en soluciones acuosas, ácidas y básicas. Cuando la TCEP se disuelve directamente en agua, el pH resultante es de aproximadamente 2,5.
• La TCEP no es particularmente estable en tampones de fosfato, en especial a un pH neutro o alcalino. De esta forma, si va a utilizar TCEP en tampones PBS, prepare la solución de trabajo justo antes de usarla.
• La TCEP puede utilizarse como sustituta del DTT o el 2-mercaptoetanol (2-ME) en el tampón de carga de muestras para SDS-PAGE. Utilice una concentración final de 50 mM de TCEP.
• Debido a que la TCEP se carga en solución, no es compatible para su uso en isoelectroenfoque.