Die Thermo Scientific Pierce Plus aktivierte Peroxidase ist eine aminreaktive Form der Meerrettich-Peroxidase (HRP), die Kopplungseffizienzen von über 95 % mit Antikörpern und anderen Proteinen bietet. Jedes Kit enthält 5 x 1 mg gefriergetrocknete HRP und ausreichend Natriumcyanoborhydrid-Lösung, Quench-Puffer und Puffer zur Konjugation von 5 mg Immunoglobulin (IgG)
Merkmale des Thermo Scientific Pierce Plus aktivierte Peroxidase-Kits:•
Aktivierte HRP – Mit Periodat behandelte und mit Aldehyd aktivierte Meerrettich-Peroxidase, bereit für die Konjugation an Antikörper und andere Proteine an der Position von primären Aminen (z. B. Lysinen)
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Permanente Konjugation – reagiert effizient (95 %) mit primären Aminen, um kovalente Amidbindungen nach der Behandlung mit Natriumcyanoborhydrid zu bilden (im Kit enthalten)
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Hohe HRP-Aktivität – Enzymaktivität beträgt 120 bis 200 Einheiten/mg; gefriergetrocknetes, aktiviertes Enzym ist für mindestens 12 Monate bei -20 °C stabil
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Praktische Mengen – je 1 mg aktiviertes Enzym reichen für eine Reaktion mit 1 mg IgG aus, um ca. 0,5 ml Konjugat herzustellen
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Anpassbar – Variation der molaren Verhältnisse, der Reaktionspuffer, des pH-Werts und anderer Parameter, um Konjugate mit verschiedenen Stufen der HRP-Integration und Aktivität zu erhalten
Plus aktivierte Peroxidase ist ein HRP-Enzym (Meerrettich-Peroxidase), dessen native Kohlenhydrate (Zucker) schonend mit Periodat oxidiert wurden, um aminreaktive Aldehydgruppen herzustellen. Diese Carbonyle der Plus aktivieren Peroxidase vernetzen sich spontan und effizient mit primären Aminen auf Antikörpern oder anderen Proteinen. Die Methode ist effektiver als andere aminreaktive Chemikalien, wie die Glutaraldehydkopplung, die häufig zu Polymerisation und einer größeren Inaktivierung des Konjugats führt. Das voraktivierte Enzym beseitigt die Schwierigkeiten bei der kompletten Vorbereitung und Validierung der aktivierten Peroxidase. Das Kit enthält das Enzym, die Zubehörreagenzien und das Protokoll zur einfachen Herstellung von Hochleistungs-Konjugaten für Western Blotting, ELISA und andere Nachweisverfahren.
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