Pierce™ Streptavidin-Harze

Thermo Scientific Pierce Streptavidin-Agarose ist ein Beadagarose-Harz mit Standardkapazität aus immobilisiertem rekombinantem Streptavidin-Protein für den Einsatz in einer Vielzahl von Biotin-bindenden Affinitätsreinigungsverfahren.

Merkmale der Streptavidin-Agarose:

• Streptavidin — Gereinigtes, rekombinantes Streptavidin-Protein (53 kDa, nahezu neutraler pI); tetrameres Protein mit vier Biotin-bindenden Stellen pro Molekül
• Agaroseharz — Der Träger ist eine vernetzte, 6%ige Beadagarose (CL-6B), das beliebteste Harz zur Proteinaffinitätsreinigung
• Inert und stabil — Streptavidin wird durch ladungsfreie, laugungsbeständige kovalente Bindungen immobilisiert, was zu einer geringen unspezifischen Bindung führt und mehrere Anwendungen ohne Ertragsverlust ermöglicht
• Standardkapazität — Diese Beads haben eine normale Ladung immobilisierten Streptavidins und bieten eine Bindungskapazität von 1 bis 3 mg biotinyliertem BSA pro Milliliter Harz

Merkmale der vernetzten, 6%igen Beadagarose (CL-6B):
• Unterstützung der pH-Stabilität: 2 bis 14 (kurzfristig); 3 bis 13 (langfristig)
• Durchschnittliche Partikelgröße: 45 bis 165 Mikrometer
• Ausschlussgrenze: 10.000 bis 4.000.000 Dalton
• Maximale volumetrische Durchflussrate: Ca. 1 ml/Minute (für Säulendurchmesser 1 cm)
• Maximale lineare Geschwindigkeit: 30 cm pro Stunde
• Maximaler Druck: Weniger als 25 psi (1,5 bar)

Anwendungen:
• Aufreinigung von Membranantigenen in Verbindung mit biotinylierten monoklonalen Antikörpern
• Isolierung von Zelloberflächenproteinen, die mit einem spaltbaren Biotinylierungsreagenz markiert wurden
• Isolierung von Zelloberflächen-Glykoproteinen mit biotinyliertem Concanavalin A
• Rückgewinnung einsträngiger biotinylierter DNA zur Dideoxy-Sequenzierung
• Streptavidin-beschichtete Platten zur direkten Festphasensequenzierung
• In-vitro-Mutagenese mit Streptavidin-beschichteten Platten
• DNA-Fingerprinting mit Streptavidin-beschichteten Platten

Pierce Streptavidin-Agarose besteht aus gereinigtem rekombinantem Streptavidin, das kovalent auf qualitativ hochwertiger, vernetzter, 6%iger Beadagarose immobilisiert wurde. Bei Streptavidin handelt es sich um ein tetrameres Biotin-bindendes Protein. Die Agarosebeads weisen physikalische und chemische Eigenschaften auf, die ihren Einsatz in einer Vielzahl von Batch- oder Säulen-Affinitätsverfahren ermöglichen. Mit diesem Streptavidin-Harz können biotinylierte Antikörper, Proteine, Peptide, Nukleinsäuren und andere Moleküle oder Interaktionskomplexe erfasst, immunpräzipittiert, entfernt oder aus Proben gereinigt werden.

Streptavidin ist ein tetramerisches Protein mit vier Biotin-bindenden Stellen ähnlich wie Avidin. Das native Protein aus Streptomyces avidinii ist Kohlenhydrat-frei, hat einen sauren pI von 5,5 und eine Masse von 75 kDa. Das rekombinante Protein, das zur Herstellung von Thermo Scientific Pierce Streptavidin-Harzen verwendet wird, hat einen nahezu neutralen isoelektrischen Punkt und eine Masse von 53 kDa. Streptavidin hat aufgrund fehlender Kohlenhydraten im Allgemeinen weniger unspezifische Bindungen als Avidin (aus Hühnereiweiß).

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