EZ-Link™ Sulfo-NHS-LC-Biotinylation Kit

Das Thermo Scientific EZ-Link Sulfo-NHS-LC-Biotinylierungskit enthält Reagenzien, die für 10 Biotinylierungsreaktionen ausreichen (z. B. 1 –10 mg Antikörper pro Reaktion). Das im Kit enthaltene EZ-Link Sulfo-NHS-LC-Biotin-Reagenz ist ein wasserlösliches mittellanges Biotinylierungsreagenz, das zur Markierung von Antikörpern, Proteinen und anderen Molekülen mit primären Aminen.

Merkmale von EZ-Link Sulfo-NHS-LC-Biotin:

• Proteinkennzeichnung—Biotinylierung von Antikörpern zur Immobilisierung, Aufreinigung und zum Nachweis mit Streptavidin-Harzen oder Proben
• Zelloberflächenkennzeichnung—biotinylisiert nur die Oberflächenproteine ganzer Zellen, da das negativ beladene Reagenz die Zellmembranen nicht durchdringt
• Amin-reaktiv—reagiert mit primären Aminen (-NH2), wie Lysin-Seitenketten oder Aminotermini von Polypeptiden
• Löslich—die beladene Sulfo-NHS-Gruppe erhöht die Löslichkeit des Reagenzienwassers im Vergleich zu normalen NHS-Ester-Verbindungen
• Irreversibel—bildet dauerhafte Amid-Verbindungen; der Spacerarm kann nicht gespalten werden
• Mittlere Länge—der Spacerarm (Gesamtlänge zum Ziel hinzugefügt) beträgt 22,4 Angström und bietet eine exzellente Ballance zwischen einer angemessenen Länge (minimale sterische Behinderung der Biotinbindung) und einer relativ geringen Masse

Sulfo-NHS-LC-Biotin ist eins von drei sehr ähnlichen, wasserlöslichen und nicht spaltbaren EZ-Link Reagenzien, die eine einfache und effiziente Biotinylierung von Antikörpern, Proteinen und anderen primären aminhaltigen Makromolekülen in Lösung ermöglichen. Die spezifische Markierung von Zelloberflächenproteinen ist eine weitere häufige Anwendung für diese einzigartig wasserlöslichen und nicht membrangängigen Reagenzien. Die drei Sulfo-NHS-Ester-Reagenzien, die sich nur in der Länge ihrer Spacerarme unterscheiden, können Markierungs- und Nachweisexperimente optimieren, bei denen die sterische Hinderung der Biotinbindung ein bedeutender Faktor ist. Sulfo-NHS-LC-Biotin wird in verschiedenen Packungsgrößen und als komplette Proteinmarkierungskits angeboten.

Unsere Biotin-Reagenzien gewährleisten die höchstmögliche Gesamtproduktintegrität, -konsistenz und -leistung für die vorgesehenen Forschungsanwendungen.

N-Hydroxysulfosuccinimid (NHS) Ester aus Biotin sind die beliebtesten Biotinylierungsreagenzien. NHS-aktivierte Biotine reagieren effizient mit primären Aminogruppen (-NH2) in alkalischen Puffern und bilden stabile Amidbindungen. Proteine (z. B. Antikörper) haben in der Regel mehrere primäre Amine, die als Kennzeichnungsziele zur Verfügung stehen, einschließlich der Seitenkette von Lysinrückständen (K) und des N-Endterminus jedes Polypeptids.

Biotinvielfalt NHS-Ester unterscheiden sich in Länge, Löslichkeit, Zelldurchlässigkeit und Spaltbarkeit. Nicht sulfonierte NHS-Biotine sind zellpermeabel, müssen jedoch in einem organischen Lösungsmittel wie DMSO oder DMF gelöst werden. Sulfo-NHS-Biotine (und solche mit pegyliertem Spacer) sind direkt wasserlöslich, können jedoch nicht die Zellmembran durchdringen. Varianten mit Disulfidbindungen sind mit Reduktionsmitteln spaltbar, wodurch sich die Biotingruppe vom markierten Protein trennen lässt.

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