Thermo Scientific Pierce SMCC es un entrecruzador heterobifuncional con grupos de éster de N-hidroxisuccinimida (NHS) y maleimida que permiten la conjugación covalente de moléculas que contienen amina y sulfhidrilo. Los ésteres NHS reaccionan con aminas primarias a pH 7–9 para formar enlaces de amida con maleimidas que reaccionan con grupos sulfhidrilo a at pH 6,5–7,5 para formar enlaces de tioéter estables. En soluciones acuosas, la degradación hidrolítica del éster NHS es una reacción competidora cuya velocidad aumenta con el pH. El grupo de maleimida es más estable que el grupo de ésteres NHS, pero se hidroliza lentamente y pierde su especificidad de reacción para los sulfhidrilos a valores de pH > 7,5. Por estas razones, los conjugados con estos entrecruzados se realzian a un pH 7,2–7,5, con el éster NHS (objetivo de amina) con reacción antes o después con la reacción de maleimida (objetivo de sulfhidrilo).
El anillo de ciclohexano en el agente separador de este reactivo disminuye la velocidad de hidrólisis del grupo de maleimida en comparación con los reactivos similares que no contienen este anillo. Esta característica permite que las proteínas que tengan la maleimida activada con SMCC se liofilicen y almacenen para una conjugación posterior con una molécula que contiene sulfhidrilo. Muchos productos protéicos activados por maleimida se producen de esta forma.
Los productos Thermo Scientific No-Weigh son reactivos especiales suministrados en un formato predividido. El envase prepesado evita la pérdida de reactividad del reactivo y la contaminación con el tiempo eliminando la apertura y el cierre repetitivos del vial. El formato permite el uso de un vial de reactivo fresco cada vez, lo que elimina la molestia de pesar pequeñas cantidades de reactivos y reduce las preocupaciones sobre la estabilidad del reactivo.
Características de SMCC:
•
Grupos reactivos: Éster NHS y
maleimida•
Reactivo hacia: grupos amino y sulfhidrilo
• No divisible
• Insoluble en agua (disolver primero en DMF o DMSO); comparar con
Sulfo-SMCC• El reactivo cristalino de alta pureza puede usarse para crear derivados activados con maleimida de alta pureza. No escindible
• El puente de ciclohexano confiere mayor estabilidad al grupo de maleimida haciendo de LC-SMCC un agente de entrecruzamiento ideal para la activación de maleimida de proteínas. Los grupos de maleimida son estables durante 64 horas en tampón fosfato de sodio 0,1 M, pH 7 a 4 °C.
Succinimidyl-4-(
N-maleimidometil)ciclohexano-1-carboxilato (SMCC) es un entrecruzador no escindible y permeable a la membrana Contiene una
N-hidroxisuccinimida reactiva a la amina (éster NHS) y un grupo de maleimida reactiva a sulfhidrilo. Los ésteres NHS reaccionan con aminas primarias a pH 7-9 para formar enlaces de amida estables. Las maleimidas reaccionan con grupos sulfhidrilo a pH 6,5-7,5 para formar enlaces tioetéter estables. Los grupos de maleimida de SMCC y
Sulfo-SMCC son inusualmente estables hasta un pH 7,5 debido al puente ciclohexano en el agente separador.
Aplicaciones:• Marcado enzimático de anticuerpos: - se puede preservar la especificidad del anticuerpo y de la enzima
• Cree bioconjugados específicos a través de reacciones de entrecruzamiento de uno o dos pasos
• Cree proteínas portadoras activada por maleimida, sulfhidrilo reactivas para unir haptenos
Especificaciones: fabricamos SMCC con las más altas especificaciones para producir los bioconjugados más específicos y proteínas activadas por maleimida, y para asegurar la integridad de sus datos y proporcionarle el más alto grado de consistencia en el entrecruzamiento. Cada lote de SMCC se prueba para cumplir las siguientes especificaciones mínimas.
• Identidad: Los barridos de infrarrojos muestran solo los picos característicos de la estructura y de los grupos funcionales del entrecruzador SMCC
• Pureza: ≥92 % por RMN
Referencias del producto:Guía de aplicación entrecruzada: búsqueda de referencias literarias recientes para este producto