Pierce™ SMCC

Thermo Scientific Pierce SMCC ist ein hetero-bifunktionaler Vernetzer, der N-Hydroxysuccinimid(NHS)-Ester und Maleimid-Gruppen enthält, die die kovalente Konjugation von amin- und sulfhydrilhaltigen Molekülen ermöglichen. NHS-Ester reagieren mit primären Aminen bei pH 7–9, um Amid-Verbindungen zu bilden, während Maleimide mit Sulfhydrylgruppen bei pH 6,5–7,5 reagieren, um stabile ThioetheVerbindungen zu bilden. In wässrigen Lösungen ist der hydrolytische Abbau von NHS-Estern eine Kompetitivreaktion, deren Rate mit dem pH-Wert steigt. Die Maleimid-Gruppe ist stabiler als die NHS-Ester-Gruppe, wird jedoch langsam hydrolysiert und verliert ihre Reaktionsspezifität für Sulfhydryle bei pH-Werten > 7,5. Aus diesen Gründen werden Konjugationen mit diesen Vernetzern in der Regel bei pH 7,2–7,5 durchgeführt, wobei der NHS-Ester (Amin-gezielt) vor oder gleichzeitig mit der Maleimid-Reaktion (Sulfhydryl-gezielt) reagiert.

Der Cyclohexan-Ring im Spacerarm dieses Reagenz verringert die Hydrolyserate der Maleimid-Gruppe im Vergleich zu ähnlichen Reagenzien, die diesen Ring nicht enthalten. Mit dieser Funktion können Proteine, die mit SMCC Maleimid-aktiviert wurden, gefriergetrocknet und für die spätere Konjugation an ein sulfhydrylhaltiges Molekül gelagert werden. Auf diese Weise werden viele Maleimid-aktivierte Proteinprodukte hergestellt.

Thermo Scientific No-Weigh Produkte sind Spezialreagenzien, die in einem voraliquotierten Format geliefert werden. Die abgewogene Verpackung trägt dazu bei, den Verlust der Reagenzreaktivität und eine Kontamination im Laufe der Zeit zu verhindern, weil das Fläschchen nicht wiederholt geöffnet und geschlossen werden muss. Das Format ermöglicht die Verwendung frischer Reagenzfläschchen bei jedem Einsatz, wodurch das mühsame Abwiegen kleiner Reagenzienmengen vermieden und Bedenken hinsichtlich der Reagenzienstabilität reduziert werden.

Merkmale von SMCC:

• Reaktive Gruppen: NHS-Ester und Maleimid
• Reaktiv gegen: Amino- und Sulfhydrylgruppen
• Nicht spaltbar
• Wasserunlöslich (zuerst in DMF oder DMSO auflösen); Vergleich mit Sulfo-SMCC
• Hochreines, kristallines Reagenz kann zur Herstellung hochreiner Maleimid-aktivierter Derivate verwendet werden
• Die Cyclohexan-Brücke verleiht der Maleimid-Gruppe zusätzliche Stabilität und macht SMCC zu einem idealen Vernetzungsmittel für die Maleimid-Aktivierung von Proteinen. Maleimid-Gruppen sind in 0,1 M Natriumphosphatpuffer, pH 7 bei 4 °C 64 Stunden lang stabil.

Succinimidyll-4-(N-Maleimidomethyl)cyclohexan-1-carboxylat (SMCC) ist ein nicht spaltbarer und membrangängiger Vernetzer. Er enthält ein Amin-reaktives N-Hydroxysuccinimid (NHS-Ester) und eine Sulfhydryl-reaktive Maleimid-Gruppe. NHS-Ester reagieren mit primären Aminen bei einem pH-Wert von 7 bis 9 und bilden stabile Amidbindungen. Maleimide reagieren mit Sulfhydrylgruppen bei einem pH-Wett von 6,5 bis 7,5 und bilden stabile Thioetherbindungen. Die Maleimid-Gruppen von SMCC und Sulfo-SMCC sind aufgrund der Cyclohexan-Brücke im Spacerarm bis pH 7,5 ungewöhnlich stabil.

Anwendungen:
• Enzymmarkierung von Antikörpern – sowohl die Enzym- als auch die Antikörperspezifität können erhalten werden
• Erstellen Sie spezifische Biokonjugate durch ein- oder zweistufige Vernetzungsreaktionen
• Erstellen Sie Sulfhydryl-reaktive, Maleimid-aktivierte Trägerproteine zur Kopplung von Haptenen

Spezifikationen:
Wir stellen SMCC nach den höchsten Anforderungen her, um die spezifischsten Biokonjugate und Maleimid-aktivierten Proteine zu produzieren, die Integrität Ihrer Daten zu gewährleisten und Ihnen ein Höchstmaß an Konsistenz bei der Vernetzung zu bieten. Jede Charge SMCC wird auf folgende Mindestanforderungen getestet.

• Identität: IR-Messung zeigt nur Peaks an, die für die Struktur und die funktionellen Gruppen von SMCC-Crosslinkern charakteristisch sind
• Reinheit: ≥92 % mittels NMR

Produktreferenzen:
Crosslinker Anwendungsleitfaden – Suchanfrage nach aktuellen Literaturreferenzen für dieses Produkt