Pierce™ SM(PEG)12, No-Weigh™ Format

Thermo Scientific Pierce SM(PEG)12 ist ein hetero-bifunktionaler Vernetzer mit N-Hydroxysuccinimid-Ester (NHS-Ester) und Maleimid-Gruppen, die kovalente Konjugation von Amin- und Sulfhydrylmolekülen ermöglichen. Vernetzer mit Polyethylenglycol-Spacern (PEG) sind praktische und nützliche Alternativen zu solchen mit reinen Kohlenwasserstoff-Spacerarms. Die PEG-Spacer verbessern die Wasserlöslichkeit der Reagenzien und Konjugate, reduzieren das Aggregationspotenzial des Konjugats und erhöhen die Flexibilität der Vernetzung, was zu einer reduzierten immunogenen Reaktion auf den Spacer selbst führt. Im Gegensatz zu typischen PEG-Reagenzien mit heterogenen Mischungen unterschiedlicher PEG-Kettenlängen sind Pierce PEGylierungsreagenzien homogene Verbindungen mit definiertem Molekulargewicht und Spacerarm-Länge, was eine höhere Präzision bei der Optimierung und Charakterisierung von Vernetzungsanwendungen ermöglicht.

Thermo Scientific No-Weigh-Produkte sind Spezialreagenzien, die in einem voraliquotierten Format geliefert werden. Die abgewogene Verpackung trägt dazu bei, den Verlust der Reagenzreaktivität und eine Kontamination im Laufe der Zeit zu verhindern, weil das Fläschchen nicht wiederholt geöffnet und geschlossen werden muss. Das Format ermöglicht die Verwendung frischer Reagenzfläschchen bei jedem Einsatz, wodurch das mühsame Abwiegen kleiner Reagenzmengen vermieden und Bedenken hinsichtlich der Reagenzienstabilität reduziert werden.

Merkmale von SM(PEG)12:

• Reaktive Gruppen: NHS-Ester und Maleimid
• Reaktiv gegen: Amino- und Sulfhydrylgruppen
• Irreversible Vernetzung von Proteinen und Peptiden durch flexible PEG-Spacerarme
• Spacerarme aus Polyethylenglykol halten die Löslichkeit des Konjugats aufrecht
• Die reine Verbindung mit definierter Struktur und definiertem Molekulargewicht gewährleistet reproduzierbare Proteinmodifikationseffekte
• Der PEG-Spacer bietet einzigartige Vorteile, einschließlich erhöhter Stabilität, reduzierter Aggregationstendenz und verringerter Immunogenität
• Ideal zur Durchführung kontrollierter, zweistufiger Proteinkonjugationen (siehe Sulfo-SMCC)

SM(PEG)n NHS- und Maleimid-aktivierte PEG-Verbindungen zur Vernetzung von primären Aminen (NH2) und Sulfhydryl(SH)-Gruppen in Proteinen und anderen Molekülen. Es wird ein vollständiger Satz von Verbindungen angeboten, die jeweils dieselbe heterobifunktionale Struktur (NHS-PEGn-Maleimid) aufweisen, aber in der Anzahl der diskreten Ethylenglykol-Einheiten unterschiedlich sind (n = 2, 4, 6, 8, 12 oder 24). Die N-Hydroxysuccinimid-Ester(NHS)-Gruppe reagiert spezifisch und effizient mit Lysin- und N-terminalen Aminogruppen bei pH 7 bis 9, um stabile Amidbindungen zu bilden. Die Maleimid-Gruppe reagiert mit reduzierten Sulfhydrylen bei pH 6,5 bis 7,5 und bildet so stabile Thioether-Bindungen.

Andere Bezeichnungen für SM(PEG)n:
• NHS-dPEG-Mal
• Mal-PEG-NHS-Ester
• NHS-PEO-Maleimid
• Succinimidyl-dPEG-Maleimid
• Succinimid-Maleimid-PEG

Warum sollten Crosslinker mit Polyethylenglycol(PEG)-Spacerarmen verwendet werden?
PEG-haltige Reagenzien wurden zur Modifikation von Proteinen verwendet, um spezifische Vorteile zu bieten. Die Protein-PEGylierung kann die Stabilität des modifizierten Proteins verbessern, es vor proteolytischer Verdauung schützen, seine Halbwertszeit in einer biologischen Anwendung erhöhen, es vor der Entstehung einer immunogenen Reaktion schützen, seine Antigenität oder potenzielle Toxizität verringern, seine Löslichkeit verbessern, das Potenzial für Aggregation senken und Interferenzen für In-vitro- und In-vivo-Anwendungen minimieren. Polyethylenglycol hat diese Wirkungen, da es ungiftig, nicht immunogen, hydrophil, wasserlöslich und hochflexibel ist.

Vorteile von Polyethylenglycolverbindungen mit diskreter Länge:
Diese Reagenzien werden speziell synthetisiert, was zu homogenen Verbindungen mit definiertem Molekulargewicht führt, die durch diskrete Kettenlängen charakterisiert sind und eine größere Fähigkeit zur Optimierung und Charakterisierung von Oberflächenproteinmodifikationen bieten. Typische Präparate aus PEG-Verbindungen sind heterogene Gemische, die aus einer Verteilung von Kettenlängen mit einem bestimmten durchschnittlichen Molekulargewicht oder einer ungefähren Anzahl von PEG-Untereinheiten bestehen.