Invitrogen™ streptavidin-coupled Dynabeads® are a robust and versatile tool that can be used to capture specific RNA or DNA sequences and then pull them directly out of solution. 这些大小单一、超顺磁性的Dynabeads®是一种高效的固相介质,是固相硝酸纤维素的替代物,可以为您带来出众的产品质量和数据的一致性。 Excellent near–liquid phase reaction kinetics allow for extremely fast protocols. The inherent ease of magnetic handling means that downstream manipulations and buffer changes are as simple as concentrating the bead-bound target at the tube-wall with a magnet and then discarding the supernatant. 这些磁珠适用于几乎所有的样本类型,包括大多数体液、植物、动物和微生物的裂解粗产物及纯化的总RNA或DNA。 由于这些Dynabeads®只与特异性靶向RNA或DNA分子结合,因此一般无须进行上游总RNA或DNA纯化步骤。

单链DNA图片

在直接捕获过程中,双链PCR产物被固定于磁珠上。 这些双链可以轻松转换为单链磁珠结合模板,然后用于直接从溶液中捕获特异的RNA或DNA分子。

有一种间接捕获方法有时具有更快的反应动力学。 这种间接捕获过程先捕获靶点序列,然后将其固定于磁珠上。 首先,将生物素化的捕获序列 (单链DNA) 与样本一起孵育,与溶液中的RNA或DNA靶分子杂交。 Streptavidin-coated Dynabeads® are then added to the mixture and the hybridized sequences are immobilized onto the Dynabeads® via the streptavidin-biotin bond.

1 µm Dynabeads® MyOne™链酶亲和素C1 每mg磁珠的表面积极高,可以实现低丰度RNA或DNA的高度富集。 当需要从更粘的样本 (如脑脊液) 中捕获核酸时,推荐使用尺寸更大的2.8 µm Dynabeads® M-270链酶亲和素。 这些Dynabeads® (MyOne™链酶亲和素C1和M-270链酶亲和素) 的表面带有少量负电荷,确保只有极低程度的非靶向核酸序列的非特异性结合。

应用范例包括:RNA/DNA感染性物质的分离 (1,2,3,4)、差减杂交 (5,6,7)、cDNA选择和富集、突变序列的检测和分离 (8,9,10)、细胞特异性转录本的分离和mRNA差异显示。

部分参考文献

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