用于流式细胞分析的细菌计数与计数检测试剂盒

我们的流式细胞分析细菌计数和计数分析试剂盒包含了用于细菌鉴定的荧光核酸染料混合试剂,以及经过校准的可用于精确的样品体积测量的微球悬液。 对一个样品中活的和死的细菌准确的检测和计数是生物技术的许多实验操作中重要的一步。

细菌计数分析

用于流式细胞分析的细菌计数试剂盒可对细菌进行准确计数。 该试剂盒包含 SYTO BC 染料,这是一种亲和力很高的核酸染色剂,可轻易渗透革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌,产生异常明亮的绿色荧光信号。 该试剂盒还包含校准的聚苯乙烯微球悬液。 染色后的细菌信号和微球信号可以在绿色荧光通道内检测,并且可以使用前向散射和荧光通道的散点图进行区分。 样本中的细菌密度可以通过细菌信号和微球信号的比值确定。

细菌计数试剂盒散点图


图1: 使用流式细胞分析
细菌计数试剂盒进行蜡样芽孢杆菌的计数。 将细菌用 SYTO BC 细菌细胞染色剂染色并与浓度已知、荧光较弱的 6 μm 聚苯乙烯微球标准品混合,可产生前向光散射与绿色荧光强度的双变量频率分布,从而能够通过参照明确分离的微球标准群体(红色数据点所示)来测定细菌群体数量。

荧光偶联 激光 Ex/Em* 货 号
细菌计数试剂盒 488 nm 480/500 nm B7277
*表示激发和发射光。

参阅细菌计数试剂盒引用文献


细菌计数和活力分析

LIVE/DEAD BacLight 细菌活力和计数试剂盒使得研究人员可通过流式细胞仪可靠地区分和定量活/死菌,甚至可处理含有广泛细菌类型的混合菌群。 该试剂盒利用两种核酸染料(绿色荧光 SYTO 9 染料和红色荧光碘化丙啶染料)的混合物进行活力测定,并配有用于精确样品体积测量的校准的微球悬浮液。
 

图 2. 采用LIVE/DEAD BacLight 细菌活力和计数试剂盒分析细菌培养物。 按照试剂盒操作步骤,活的(未处理的)和死的(乙醇处理的)金黄色葡萄球菌(图A和C)和大肠杆菌(图B和D)的悬浮液与SYTO 9核酸染色和碘化丙啶进行染色,再利用流式细胞仪进行分析。 绿色或红色荧光-侧散射(green or red fluorescence versus side scatter)细胞散点图(图A或B)被用来区分细菌细胞群体与微球群体(分别为左框和右框)。 在每个细胞散点图中的细菌区域的结果又以红色荧光-绿色荧光细胞散点图的形式进行了显示(图C和D)。 每毫升活的和死的细菌浓度可以从荧光-侧散射细胞散点图或绿色荧光-红色荧光细胞散点图中计算得到,其选择取决于哪一个图能更好的将活细胞群体和死细胞群体分开。 活细胞群体和死细胞群体在这些细胞散点图中的位置可能取决于细菌细胞的类型和革兰氏性质。 一些样品的散点结果可能会落在限定的区域以外,这需要进行适当地评价(例如,参见图D)。

产品 激光 Ex/Em* 凋亡细胞染色剂 死细胞染色剂
货 号
LIVE/DEAD BacLight 细菌活性和计数试剂盒 488nm 480/500 nm (L)
490/635 nm (D)
SYTO 9 碘化丙啶
L34856
*表示激发和发射光。 L = 存活,D = 死亡。

参阅 LIVE/DEAD BacLight 细菌活性和计数试剂盒引用文献

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