MicroRNA(miRNA)是一种小片段非编码RNA分子,直接转录后抑制基因表达。 它们在许多基本的生物过程,比如发育、细胞增殖、分化和细胞周期中一直都是关键的调节因子。 最新证据还显示miRNA还和人类疾病发病机制有关,这些疾病包括癌症、代谢疾病、神经障碍和感染。

常见miRNA研究应用:

  • miRNA 分析—使用qPCR鉴定差异表达的成熟miRNA,应用领域包括肿瘤、代谢疾病和自身免疫疾病等。
  • miRNA定量—使用qPCR进行成熟miRNAs特异性定量分析。
  • miRNA验证—使用qPCR验证miRNA分析结果。
  • miRNA功能分析—使用miRNA模拟物和miRNA抑制物进行功能研究。
  • 非编码RNA(ncRNA)分析—对于片段大于200碱基的非编码人、大鼠或小鼠转录本的可靠检测和定量分析。
  • 小RNA分析—发现和测量任何小RNA
  • Pri-miRNA分析—发现和测量来自人、大鼠或小鼠的Pri-miRNAs

Applied Biosystems TaqMan MicroRNA检测试剂盒是一种miRNA研究的创新工具,可用于从提取到发现,分析,定量,验证和功能分析等所有与miRNAs有关的操作。 我们研发了两种能够基于TaqMan探针的real-time PCR分析方法,实现miRNAs高灵敏度检测,精准定量和分析。

  • TaqMan Advanced miRNA Assays使用基于连接反应的通用逆转录,操作流程更为简便。
  • TaqMan MicroRNA Assays — 这一经典版本在3’端延伸模板上使用目标特异性的颈环逆转录引物,能够实现高灵敏度检测。

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Real-time PCR microRNA流程:

分离RNA

 

使用能保持RNA完整性和表达谱的方法提取RNA

  • RNA提取试剂盒
    创新的Ambion和Invitrogen RNA提取产品

  • mirVana miRNA提取试剂盒
    这些试剂盒能够从组织和细胞中快速提取总RNA,包括小RNA。提取的小RNA种类有miRNA,小干扰RNA(siRNA)和核小RNA(siRNA)。  我们的试剂盒能够处理多目标或者高通量样本。

  • TaqMan miRNA ABC纯化试剂盒
    和经典的 TaqMan MicroRNA分析工具共同使用,能够从不同样本类型,包括血液,血清,血浆,FFPE,固体组织,培养细胞,唾液或尿液中获得高质量的miRNA,进行灵敏度高的特异性miRNA表达分析。

设计和优化引物

非Applied Biosystems TaqMan 分析所必需 这些分析已达到我们业界领先的生物信息学设计标准。

逆转录

将各种浓度范围的RNA转化为cDNA

TaqMan Advanced miRNA cDNA 合成试剂盒
使用通用引物和预混液进行miR-Amp通用扩增,可增加各个目标片段cDNA的量,从1pg总RNA或2 μL 血清/血浆中检测出低至60的拷贝数。 TaqMan Advanced miRNA Assays预扩增步骤

注意在RT之后还有一步预扩增。 TaqMan Advanced miRNA cDNA合成试剂盒包含了 miR-Amp扩增混合物和 miR-Amp 混合引物。

TaqMan MicroRNA逆转录试剂盒
经典的 TaqMan microRNA试剂盒,与TaqMan MicroRNA分析工具共同用来将miRNA转换成cDNA(miRNA特异性RT)  适合1-10个目标片段 与 TaqMan Advanced miRNA产品不可共用。

Megaplex RT引物(适合TAC和OpenArray)
可简化实验流程。Megaplex RT引物能够一步完成TaqMan MicroRNA芯片实时PCR 分析的cDNA准备。

Megaplex PreAmp引物
预扩增和逆转录引物和经典 TaqMan MicroRNA 检测试剂盒(而不是 TaqMan Advanced MicroRNA产品)共同使用,非常适合于检测灵敏度优先重要的分析实验。Megaplex PreAmp引物极大地增强了低表达水平的miRNA检测,使得微量样品的全方位表达分析成为了可能。最少样品量只需要1ng总RNA。

注意: 能和OpenArray,少于350ngRNA的 TAC共同使用,适合大于350ng RNA 的TaqMan Array Cards。 对于单管分析,可以使用合适的方案预扩增。

TaqMan PreAmp扩增混合物
使得低至1ng cDNA足够完成200次real-time PCR反应,然后可以进一步使用 TaqMan基因表达分析产品进行基因表达分析。

扩增cDNA

使用TaqMan 分析和 Applied Biosystems TaqMan扩增混合物扩增cDNA。 这些产品中包含进行TaqMan®Real-time PCR分析的酶、缓冲液、引物和探针,只需加入cDNA。

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运行qPCR

实时PCR和数字PCR设备

设备比较›

分析

使用直观的软件数据分析工具处理和解读qPCR数据,以满足各种应用需求

分离RNA

 

使用能保持RNA完整性和表达谱的方法提取RNA

  • RNA提取试剂盒
    创新的Ambion和Invitrogen RNA提取产品

  • mirVana miRNA提取试剂盒
    这些试剂盒能够从组织和细胞中快速提取总RNA,包括小RNA。提取的小RNA种类有miRNA,小干扰RNA(siRNA)和核小RNA(siRNA)。  我们的试剂盒能够处理多目标或者高通量样本。

  • TaqMan miRNA ABC纯化试剂盒
    和经典的 TaqMan MicroRNA分析工具共同使用,能够从不同样本类型,包括血液,血清,血浆,FFPE,固体组织,培养细胞,唾液或尿液中获得高质量的miRNA,进行灵敏度高的特异性miRNA表达分析。

设计和优化引物

非Applied Biosystems TaqMan 分析所必需 这些分析已达到我们业界领先的生物信息学设计标准。

逆转录

将各种浓度范围的RNA转化为cDNA

TaqMan Advanced miRNA cDNA 合成试剂盒
使用通用引物和预混液进行miR-Amp通用扩增,可增加各个目标片段cDNA的量,从1pg总RNA或2 μL 血清/血浆中检测出低至60的拷贝数。 TaqMan Advanced miRNA Assays预扩增步骤

注意在RT之后还有一步预扩增。 TaqMan Advanced miRNA cDNA合成试剂盒包含了 miR-Amp扩增混合物和 miR-Amp 混合引物。

TaqMan MicroRNA逆转录试剂盒
经典的 TaqMan microRNA试剂盒,与TaqMan MicroRNA分析工具共同用来将miRNA转换成cDNA(miRNA特异性RT)  适合1-10个目标片段 与 TaqMan Advanced miRNA产品不可共用。

Megaplex RT引物(适合TAC和OpenArray)
可简化实验流程。Megaplex RT引物能够一步完成TaqMan MicroRNA芯片实时PCR 分析的cDNA准备。

Megaplex PreAmp引物
预扩增和逆转录引物和经典 TaqMan MicroRNA 检测试剂盒(而不是 TaqMan Advanced MicroRNA产品)共同使用,非常适合于检测灵敏度优先重要的分析实验。Megaplex PreAmp引物极大地增强了低表达水平的miRNA检测,使得微量样品的全方位表达分析成为了可能。最少样品量只需要1ng总RNA。

注意: 能和OpenArray,少于350ngRNA的 TAC共同使用,适合大于350ng RNA 的TaqMan Array Cards。 对于单管分析,可以使用合适的方案预扩增。

TaqMan PreAmp扩增混合物
使得低至1ng cDNA足够完成200次real-time PCR反应,然后可以进一步使用 TaqMan基因表达分析产品进行基因表达分析。

扩增cDNA

使用TaqMan 分析和 Applied Biosystems TaqMan扩增混合物扩增cDNA。 这些产品中包含进行TaqMan®Real-time PCR分析的酶、缓冲液、引物和探针,只需加入cDNA。

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实时PCR和数字PCR设备

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分析

使用直观的软件数据分析工具处理和解读qPCR数据,以满足各种应用需求


其他miRNA类别

我们提供更多有关real-time PCR microRNA和ncRNA研究的选择。

  • TaqMan Non-coding RNA Assays
    实现对于片段大于200碱基的非编码人,大鼠或小鼠转录本的可靠检测和定量分析。

  • TaqMan Pri-miRNA Assays
    发现和测量来自人,大鼠或小鼠的初级miRNAs。

  • TaqMan miRNA Flexible Content Panels
    为客户提供了一种简便的挑选和设计分析内容组成的手段,用以进行通路上大量基因,疾病或生物过程的分析。分析有三种形式——TaqMan Array Plates, TaqMan Array Cards或OpenArray Plates。可供选择物种如下:人,大鼠和小鼠。
  • 定制TaqMan Small RNA Assays
    当没有预先设计好的分析可用时,定制分析对于您的小RNA定量分析是最为理想的。您唯一需要提供的就是感兴趣的序列。

  • miRNA模拟物和抑制物
    50,000多条miRNA模拟物能够模拟内源miRNAs,通过上调miRNA活性进行miRNA功能分析。而抑制物能够特异性地结合内源miRNA分子,通过下调miRNA活性进行miRNA功能分析。