微球照片
  • 可信—有助于确保仪器每日最佳性能
  • 可靠—为持续的数据采集实现最小程度的差异
  • 兼容性—适用于任何仪器的全系列工具

仪器的校准对于收集并分析准确的实验数据至关重要。 我们的流式细胞比对及细胞分选微球可帮助您确保流式细胞仪处在最佳的性能状态、获得最为稳定的实验设计并收集分析最为准确的数据。 此外,我们的大小校准及对照试剂盒可帮助流式细胞仪用户实现可靠的大小对照。

流式细胞仪校准微球选择指南

  Rainbow校准颗粒 AlignFlow 流式细胞比对微球
用途 流式细胞仪日常校准
内容 Single mixture of particles featuring 8 different fluorescent intensities. Single fluorescence, laser-specific particles available in three versions (per laser excitation).
激光类型 UV至红色激光 UV 激光 蓝色激光 红色激光
激发 365–650 nm 350–370 nm 488 nm 633 nm
发射 400–680 nm 400–470 nm 515–660 nm 645–680 nm
微球直径 3.0–3.4 micron 2.5 micron 6.0 micron 2.5 micron 6.0 micron 2.5 micron 6.0 micron
货号 A34305 A16502 A16505 A16500 A16503 A16501 A16504
  流式细胞大小校准试剂盒
用途 Estimate the size of cells in an experimental sample by comparing the FSC signals with those of the reference microspheres.
内容 Contains six suspensions of unstained polystyrene microspheres (1.0 micron to 15 micron diameter).
激光类型 全部
货号 F13838
  流式细胞亚微米颗粒大小对照试剂盒
用途 该试剂盒可用于检查:
  • 颗粒大小测量的分辨率极限和动态范围
  • 前向和侧向散射光电倍增管的灵敏性
  • 仪器基线噪音水平
  • 激光和光学设备的比对和稳定性
  • 流体系统的稳定性
内容 Set of 6 green-fluorescent microsphere suspensions (0.02 micron to 2.0 micron diameter).
激光类型 蓝色激光
激光 488 nm
发射 515 nm
货号 F13839
  细胞分选微球
用途 Routine calibration of flow cytometry sorters. Beads can be used to check cell sorter settings such as drop delay and efficiency (cell loss during sorting).
内容 Fluorescent-dye infused 6 micron (+/– 10%) microspheres that have been optimized for use with either UV, blue, green/yellow and red lasers.
激光类型 UV 蓝色激光 绿色/黄色激光 红色激光
激光 UV 405 nm 488 nm 532/561 nm 633 nm
发射 460 nm 515 nm 575 nm 680 nm
配对荧光染料 DAPI,Hoechst 染料 FITC, Alexa Fluor 488 R-PE,四甲基若丹明 Cy 5
货号 C16505 C16508 C16509 C16507
  Rainbow校准颗粒 AlignFlow 流式细胞比对微球
用途 流式细胞仪日常校准
内容 Single mixture of particles featuring 8 different fluorescent intensities. Single fluorescence, laser-specific particles available in three versions (per laser excitation).
激光类型 UV至红色激光 UV 激光 蓝色激光 红色激光
激发 365–650 nm 350–370 nm 488 nm 633 nm
发射 400–680 nm 400–470 nm 515–660 nm 645–680 nm
微球直径 3.0–3.4 micron 2.5 micron 6.0 micron 2.5 micron 6.0 micron 2.5 micron 6.0 micron
货号 A34305 A16502 A16505 A16500 A16503 A16501 A16504
  流式细胞大小校准试剂盒
用途 Estimate the size of cells in an experimental sample by comparing the FSC signals with those of the reference microspheres.
内容 Contains six suspensions of unstained polystyrene microspheres (1.0 micron to 15 micron diameter).
激光类型 全部
货号 F13838
  流式细胞亚微米颗粒大小对照试剂盒
用途 该试剂盒可用于检查:
  • 颗粒大小测量的分辨率极限和动态范围
  • 前向和侧向散射光电倍增管的灵敏性
  • 仪器基线噪音水平
  • 激光和光学设备的比对和稳定性
  • 流体系统的稳定性
内容 Set of 6 green-fluorescent microsphere suspensions (0.02 micron to 2.0 micron diameter).
激光类型 蓝色激光
激光 488 nm
发射 515 nm
货号 F13839
  细胞分选微球
用途 Routine calibration of flow cytometry sorters. Beads can be used to check cell sorter settings such as drop delay and efficiency (cell loss during sorting).
内容 Fluorescent-dye infused 6 micron (+/– 10%) microspheres that have been optimized for use with either UV, blue, green/yellow and red lasers.
激光类型 UV 蓝色激光 绿色/黄色激光 红色激光
激光 UV 405 nm 488 nm 532/561 nm 633 nm
发射 460 nm 515 nm 575 nm 680 nm
配对荧光染料 DAPI,Hoechst 染料 FITC, Alexa Fluor 488 R-PE,四甲基若丹明 Cy 5
货号 C16505 C16508 C16509 C16507

Rainbow Calibration Particles

Rainbow Calibration Particles contain a mixture of 3.0 micron particles in different fluorescent intensities. The calibration particles can be used for routine calibration of flow cytometers using wavelengths ranging from 365 nm to 650 nm.

histogram showing 8 peaks
Figure 1. Histogram analysis of particle fluorescence at 488 nm excitation and 530/30 nm emission.
scatter plot showing fluorescence at 530/30 nm and 670/14 nm
Figure 2. Particle fluorescence plotted at 488 nm excitation and 530/30 nm emission versus 633 nm excitation and 670/14 nm emission.

比对

Invitrogen AlignFlow 流式细胞比对微球是一种用于流式细胞仪比对、聚焦并校准的可靠对照。 这些荧光染色的聚苯乙烯微球颗粒在大小和荧光强度上具有高度的一致性(图 1),并可模拟与生物学样品具有相似的大小、发散波长和强度。 由于染料包含在微球的基质内部而非表面,AlighFlow 微球具有极佳的光化学性和物理稳定性,为仪器的设置提供了可靠的对照信号。 相应荧光染料也是基于流式细胞分析常用激光光源而选择的,可实现最佳激发效果。

AlighFlow 微球具有三种不同的版本,分别适用于: 350-370 nm 激发波长的紫外激光,488 nm激发波长的蓝色激光以及 633 nm 激发波长的红色激光。 每种版本具有两种微球大小: 2.5 μm 和 6 μm 直径。 可参阅下面的表格进行产品的选择。

三色直方图


图1: Invitrogen AlignFlow 流式细胞比对微球在 488 nm 处被氩离子激光激发并在三种散射频段里被监测。
宽泛的荧光散射在全部三种频段内均被监测到。 请注意微球荧光强度上极低的变异。 Roswell Park 癌症研究所的 Carleton Stewart 供图。



大小校准

Invitrogen 流式细胞大小校准试剂盒可提供一组不发荧光的微球悬浮液来为流式细胞仪用户提供可靠的大小对照。 该试剂盒含有六种未染色的聚苯乙烯微球悬浮液,每种均具有由透射电子显微镜所确定的已知直径。 实验样品中的细胞大小可通过对前向散射 (FSC) 信号和对照微染料进行比较而得以预估。 微珠可作为具有可重复性的大小标尺(图3)并可与实验样品进行交叉混合或用于平行实验。

分析直方图


图 3. Invitrogen 流式细胞大小校准试剂盒。
前向散射强度 (FSC) 与流式细胞大小校准试剂盒中提供的六种聚苯乙烯微珠样品的频段值之间的对数关系分析结果直方图。 FSC测量在 Becton Dickinson FACScan™ 式细胞仪上采用 488 nm 激发光进行。


亚微米颗粒大小对照

Invitrogen 流式细胞亚微米颗粒大小对照试剂盒可提供一组发绿色荧光的微球悬浮液来为流式细胞分析用户提供可靠的大小对照。 该试剂盒含有六种聚苯乙烯微球悬浮液,每种均具有由透射电子显微镜所确定的已知直径。 所有微球的激发和散射图谱都与 Invitrogen Alexa Fluor 488 染料或 FITC 染色细胞(最大激发和散射波长分别为 505 nm 和 515 nm)。

实验样品中生物颗粒的大小(或大小范围)可通过比较它们与对照微球的 FSC 预估(图 4)。 每种成分中的微球都可作为可重复的大小标尺并用于单独(单一大小)、预混(两至六种)、与实验样品交叉混合或平行实验使用。 该试剂盒可用于验证仪器的性能并创建适用于亚微米颗粒分析的参数。 例如,该试剂盒可用于检查:

  • 颗粒大小测量的分辨率极限和动态范围
  • 前向和侧向散射光电倍增管的灵敏性
  • 仪器基线噪音水平
  • 激光和光学设备的比对和稳定性
  • 流体系统的稳定性

阅读流式细胞亚微米颗粒大小对照试剂盒产品手册

展示大小对照微珠位置的流式细胞分析散点图


图4:  Invitrogen 流式细胞亚微米颗粒大小对照试剂盒。
在 Attune 声波聚焦流式细胞仪上利用 488 nm 激发光和 530/30 nm 带通(BP)发射滤波器进行流式细胞亚微米颗粒大小对照试剂盒五种不同大小颗粒(该试剂盒含有六种颗粒大小;这里仅使用了五种)的信号收集。 在颗粒荧光与侧向散射相关的散点图上鉴定五种不同绿色荧光微球的大小。


细胞分选

Invitrogen 细胞分选设置微球是用于流式细胞分选仪器进行设置和校准的可靠标准品。 该微球具有 6 um(±10%) 直径,与许多生物学样品具有近似的大小、散射波长和强度。 因此,该微球还可以用于检测细胞分选仪的设置,如滴液延迟和效率(分选过程中的细胞损失)。 该微球还可用于在不浪费宝贵而灵敏的实验材料的情况下进行流式细胞仪的激光源、光学设备和射流的校准。

细胞分选设置微球的均一化散射光谱


图 2.
Invitrogen 蓝色激光细胞分选设置微球(实线)和荧光素标记细胞(虚线)的均一化散射光谱。 细胞分选设置微球的较窄散射光谱几乎处在荧光素较宽散射光谱的中央。